Дмрв на что влияет: Как Определить Неисправность Датчик Расхода Воздуха. Признаки, Проверка, Покупка ДМРВ

Содержание

Влияние датчика массового расхода воздуха на работу ДВС – Турбобаланс

Датчик массового расхода воздуха (ДМРВ) является одним из главных элементов в подготовке смеси топлива мотора, который работает по системе MAF. Он отвечает за количество воздуха, попадающего в цилиндры ДВС. 

Современные инжекторные авто оснащены ДМРВ совместно с измерителем t0C и атмосферного давления, передают информацию об условиях, в которых используется мотор. ДМРВ представляет собой трубу, оснащенную измерительным элементом. 

Назначение ДМРВ и его роль в работе мотора

Датчик МРВ контролирует объем воздуха, который проходит во впускной коллектор. На основании этих данных поддерживается необходимый состав смеси. ДМРВ монтируется в районе фильтра на входе тракта для моторов бензинового типа. На дизельных моторах с блоком EGR данные с ДМРВ являются основой для расчета объема воздуха и объема отработанных газов. Датчик МРВ позволяет осуществлять управление EGR, снижая расход горючего и загрязненных выхлопов.  

Дизельные авто с турбированными двигателями, оснащенные ДМРВ, характеризуются меньшим дымлением. С помощью полученных данных корректируется заполнение цилиндров, предупреждается перенасыщение смеси. 

Почему ДМРВ может выйти из строя?

Неисправности ДМРВ могут быть связаны с качеством воздуха. При попадании в воздушный тракт воздух должен быть чистым, что обеспечивается регулярной установкой нового фильтра. Выполнять замену чаще требуется при использовании авто в пыльных регионах. Также стоит обратить внимание на риск проникновения масла через сапун, что свидетельствует о важности профилактики системы вентиляции. Также, недопустимо проникновение воды в воздушный тракт. При мойке мотора следует укрывать тракт пленкой, либо совсем снимать его. Соблюдая требования эксплуатации можно продолжить срок службы ДМРВ. 

Какие признаки говорят о неполадках в работе датчика?

  1. Увеличенный расход топлива. Причем расход нужно определять не по компьютеру, а по мере убывания из бака. Следует залить полный бак, после прохождения 100 км долить топливо. То количество, которое вместится и есть расходом топлива на 100 км. 
  2. Сложности при запуске мотора. Запустить мотор удается только при длительной прокрутке стартера.
  3. Снижение динамики. Авто медленно разгоняется, при подъеме падает скорость, вынуждая переходить на пониженную передачу, появляется черный дым выхлопа. 
  4. Мотор глохнет при остановке. 

Такие «симптомы» не могут на 100% свидетельствовать о поломке ДМРВ. Диагностировать работу датчика можно только после комплексной проверки. Наш центр выполняет диагностику ДМРВ с использованием высокоточного оборудования.

Как влияет ДМРВ на расход топлива?

Доброго времени суток всем, кто нас читает! Продолжая освещать темы потребления различных видов горючего современными автомобилями отечественных и зарубежных марок, хочу поговорить сегодня вот на какую тематику: как влияет ДМРВ на расход топлива. Если Вам незнакома данная аббревиатура, то ниже я расскажу, что это такое и о ее скромной роли.

   Как устроен датчик

Известно каждому автолюбителю, что двигатель автомобиля может работать в различных режимах. Каждый из них будет требовать особой рабочей смеси из воздуха и горючего (например, бензина, дизельного топлива). Именно эти функции и призван выполнять датчик массового расхода воздуха, сокращенно ДМРВ, который призван вычислять массовые затраты воздуха, который требуется для успешной работы цилиндров.

В конструкцию датчика входит устройство термоанемометр, который собственно и замеряет массовое поступление воздуха. Но все это хорошо до той поры, пока ДМРВ полноценно и исправно функционирует. При этом, устройство это достаточно нежное — достаточно неудачно вытереть его ветошью и можно вывести из строя. При этом, ремонту оно не поддается, останется только один выход — полная замена.

   Как распознать что ДМРВ вышел из строя

Выше мы разобрались, как устроен датчик по контролю за поступающим воздухом. Теперь перейдем к тому, какими бывают основные симптомы и причины его неисправного состояния. Чаще всего об этом может говорить работа двигателя с характерными перебоями на холостых оборотах, а также потеря прежней динамики при разгонах автомобиля.

Слишком низкие или завышенные обороты тоже могут выступать характерным признаком появления неисправности в ДМРВ. Самой худшей ситуацией можно назвать ту, когда Вы не сможете завести мотор машины, и это тоже может быть связано с датчиком воздуха. Даже, если расходомер находится в полной исправности, то нередка разгерметизация в месте соединения его с гофрированным шлангом, который часто трескается в процессе эксплуатации.

Как еще распознать случай, когда датчик не работает? На помощь запросто может придти контрольная лампа двигателя на приборной панели под названием Check Engine. Однако, чтобы понять, что дело именно в датчике, а не в чем-либо другом, потребуется подключить компьютер с диагностической программой. Ну и, наконец, чтобы Ваш ДМРВ мог прослужить как можно дольше, следует своевременно заменять воздушный фильтрующий элемент, а также регулярно наблюдать за состоянием и износом поршневых колец и сальников. Их износ может спровоцировать повышенное скопление масла в картере, после чего пленка покрывает датчик и выводит его из строя.

   Принцип работы устройства

Чтобы понять, почему он может влиять на потребление топлива, и как обмануть ДМРВ, попробуем разобраться дальше. За каждый такт работы силового агрегата в него должно попадать примерно 14 частей горючего и 1 часть воздуха. Если взаимоотношение нарушается, это вызовет перерасход топлива или существенное снижение мощности мотора. Именно датчик должен замерять идеальный объем воздуха, поступающего в цилиндры. Он производит подсчеты и передает эти сведения бортовому компьютеру, который рассчитывает требуемый объем бензина, исходя из информации об объеме воздуха.

Найти сам датчик можно на участке между воздушным фильтром и впуском двигателя. При этом, ДМРВ ни на секунду не прекращает своей работы. Ведь с каждым нажатием на педаль акселератора изменяется количество поступающего воздуха, а, соответственно, необходимо заново рассчитать, сколько двигателю требуется горючего.

Поэтому не то, что обмануть, но и настроить датчик просто так не получится. Как уже говорилось выше, он выходит из строя при любом неудачном прикосновении или взаимодействии с агрессивными химическими веществами. Именно отсутствие возможности ремонта является самым существенным недостатком датчика, поскольку стоит он недешево.

   Влияние на потребление топлива

Сам датчик довольно требователен к тому, в каком состоянии находится воздушный фильтрующий элемент. При его сильном загрязнении, происходит и загрязнение платиновых спиралей ДМРВ. Их можно промывать, но реально выполнить это и не навредить устройству способны только специалисты. Поэтому на сегодняшний день датчик замера воздуха заменяется другим оборудованием — датчиком измерения давления.

Он работает по иному принципу. Для ДМРВ важно диагностировать объем поступающего в цилиндры воздуха, на основании которого будет рассчитано количество топлива. Исходя из плотности воздуха, может понадобиться корректировка показаний самого датчика. Чтобы выйти из данной ситуации, рядом с ДМРВ устанавливают и датчик температуры воздуха, но это уже усложняет электрическую схему.

Как видите, уважаемые автолюбители, с неисправным ДМРВ никак не получится снизить расход топлива в Вашем автомобиле. Если Вы провели диагностику и убедились, что причина заключается именно в нем, спешите на ближайшее СТО для оперативной замены. А мы вскоре встретимся с Вами на страницах новых заметок. Всем счастливо!

Место для контестной рекламы


Автор:Admin

Неисправность ДМРВ - датчик массового расхода воздуха

Датчик массового расхода воздуха (ДМРВ).

Как мы знаем, двигатель автомобиля работает в разных режимах и индивидуально для каждого из этих режимов в камеру сгорания подается определенная топливовоздушная смесь. Одним из датчиков отвечающих за формирование этой смеси, является датчик массового расхода воздуха, он же ДМРВ, он же MAF и он же MASS AIRFLOW.

Основная функция этого датчика заключается в определении количества воздуха подаваемого в двигатель и передачи этой информации на электронный блок управления т.е. «компьютер», а он, в свою очередь, определяет и корректирует соотношение топлива и воздуха.

Сам датчик находится на гофре воздуховода после воздушного фильтра и перед дроссельной заслонкой. Он небольшого размера и является по своей сути термоанемометром с очень тонким проводом из платины. Который, кстати, самоочищается при каждом выключении двигателя путем нагрева до тысячи градусов на одну секунду.

При всем при этом, не корректная работа этого маленького датчика ДМРВ приводит к сбоям работы всего двигателя. Да и повредить его достаточно просто и при неправильной чистке или монтаже/демонтаже, так и из-за грязного или некачественного воздушного фильтра. И самое обидное, что датчик не пригоден для ремонта, только замена.

По пунктам рассмотрим, какие признаки у неисправного ДМРВ:

  • Загорается всеми не любимый CHECK ENGINE
  • Нестабильная работа двигателя на холостых оборотах
  • Плохой пуск двигателя
  • Падение мощности, вялый разгон
  • Пониженные или повышенные обороты двигателя
  • Двигатель глохнет при переключении передач
  • Повышенный расход топлива

Помимо вышеизложенного, банальная трещина в гофре между датчиком и дроссельным узлом, неисправность электропроводки, грязный воздушный фильтр и т.п. могу повлиять на работу датчика и двигателя соответственно.

Как самостоятельно осуществить проверку датчика массового расхода воздуха:

Просто берем и отключаем ДМРВ. Заводим машину, которая начинает работать в аварийном режиме, обороты держаться в районе полутора тысяч, а за формирование смеси топлива и воздуха отвечает положение дроссельной заслонки и датчика ее положения (ДПДЗ). Далее пробуем проехать, и если машина на разгоне «поехала» тогда неисправность ДМРВ очевидна.
Сбой в работе может произойти после перепрошивки электронного блока управления. Проверить это можно так: на дроссельной заслонке принудительно сделать зазор в 1 мм. (можно подставить тонкую пластинку), соответственно обороты двигателя увеличатся, далее отключаем ДМРВ от питания и если нет никаких изменений в работе двигателя, то причина новая прошивка ЭБУ. 

Если же имеется исправный датчик или есть возможность его «арендовать», то ставим его. Если все в порядке, следовательно, старый датчик не исправен.
Обычные визуальный осмотр системы от воздушного фильтра до дроссельного узла, естественно с осмотром самого датчика на наличие механических повреждений.


Проверка датчика с помощью мультиметра. Новый датчик выдает напряжение 0,996-1,02 Вольт. По мере его эксплуатации напряжение на нем будет увеличиваться

  1. Нормальное рабочее напряжение 1,01-1,02В
  2. На троечку 1,02-1,03В
  3. Пора все работает надо задуматься о замене 1,03-1,04В
  4. Не рабочий датчик 1,04-1,05В
  5. Что касается самостоятельной чистки датчика ДМРВ, то лучше всего использовать спирт (водку), можно «калошу» они потом полностью испаряются и не оставляют следы как WD и ему подобные. Просто взяли, пролили и все, и ни в коем случае не лазать в него пальцами, палочками и тому подобными вещами т.к. очень легко повредить.

Признаки неисправности датчика массового расхода воздуха (ДМРВ). Как проверить дмрв

В случаях, когда на автомобиле выходит из строя датчик массового расхода воздуха, признаки неисправности могут проявляться в виде описанных далее характерных симптомов.

  • индикация «check engine» на панели приборов;
  • затрудненный пуск двигателя;
  • невозможность пуска двигателя при прокручивании стартером;
  • нестабильная работа двигателя на холостых оборотах;
  • провалы оборотов при нажатии на педаль акселератора;
  • падение мощности, затрудненный набор скорости;
  • повышенное потребление топлива.

Автор: Raul_
Механик по ХЧ и сход-развалу; стаж – 3 года.
Консультант по сервисному обслуживанию/ремонту в ДЦ Тойота; стаж – 4 года.

Назначение датчика массового расхода воздуха

ДМРВ, или MAF-сенсор (англ. – Mass Air Flow meter), он же – расходомер воздуха, является одним из компонентов топливно-воздушной системы и измеряет объем воздуха, который поступает непосредственно в камеры сгорания двигателя. Количество забираемого воздуха зависит от положения дроссельной заслонки.

На основании данных датчика, электронный блок управления ДВС высчитывает необходимый объем топлива, который нужно впрыснуть в камеры цилиндра. Корректная работа ДМРВ гарантирует оптимальное соотношение компонентов горючей смеси для ее полного сгорания за такт работы двигателя. В свою очередь, силовой агрегат выдает наилучшие показатели соотношения мощности и расхода топлива.

Датчик массового расхода воздуха присутствует на всех моделях бензиновых двигателей, которые оснащаются электронным впрыском топлива. Конструктивно располагается между воздушным фильтром и дроссельной заслонкой.

Причины выхода из строя ДМРВ

Датчик MAF (расходомер воздуха) измеряет объем воздуха через воздействие воздушного потока на чувствительный элемент, представляющий собой в ряде случаев пленку, а в других – нить, которые изготавливаются из платины. На рабочий элемент подается определенное напряжение, в результате чего происходит его нагрев. Поток воздуха охлаждает элемент. Измеряя скорость падения температуры, компьютер высчитывает, какой объем воздуха прошел через датчик за расчетную единицу времени. На основании полученных данных подается сигнал системе впрыска о необходимом количестве топлива для создания качественной горючей смеси.

Слабым местом узла является именно нагревательный элемент. Со временем на нем осаждаются мельчайшие частицы пыли, образуя налет, нарушающий нормальное охлаждение. Расчеты объема проходящего через датчик воздуха не соответствуют реальным значениям, что вызывает сбои в системе впрыска. Компьютер льет топливо, основываясь на ложных сигналах, что отражается на общей эффективности работы двигателя.

В некоторых случаях характерные признаки неисправности ДМРВ могут появляться не в результате поломки самого датчика, а вследствие подсоса воздуха в обход него. Например, при нарушении герметичности воздуховода. Таким образом, корректное функционирование системы подачи воздуха становится невозможным. Обычно механическое повреждение легко обнаруживается путем демонтажа и внимательного осмотра патрубка. Особенно часто его целостность нарушается в районе соединительных элементов и на изгибах. В данном случае проблема решается путем замены либо восстановлением поврежденной детали.

Как проверить работоспособность ДМРВ

При появлении в работе двигателя характерных признаков неисправности и выхода из строя расходомера воздуха (ДМРВ), есть несложные методы, как проверить его работоспособность и определить причину неисправности своими силами. Для этого достаточно понимать принципы функционирования данного датчика как компонента системы.

Электронный блок управления двигателем регулирует подачу топлива на основании сигналов MAF-сенсора, а при его отказе переводит систему в аварийный режим. Подача бензина начинает рассчитываться по показаниям датчика положения дроссельной заслонки и датчика коленвала, однако параметры впрыска топлива на основании этих данных получаются очень приблизительными. На некоторых автомобилях в таком режиме работы мотора холостые обороты повышаются до 1500-2000 тысяч.

Для выполнения самостоятельной диагностики достаточно на работающем двигателе отсоединить фишку MAF-сенсора. Если это сопровождается повышением оборотов силового агрегата – датчик работает. Но на некоторых моделях авто подобного может и не происходить, поэтому нужно сделать тест-драйв и обратить внимание на поведение авто. Если динамика разгона заметно улучшилась, значит проблема действительно в ДМРВ.

Дополнительно стоит провести контрольные измерения высокоточным мультиметром, если таковой имеется в наличии. Проверка производится на неработающем двигателе при включенном зажигании. Показания напряжения на выходе исправного датчика должны соответствовать пределам от 0,9 до 1,4 Вольт, превышение этого порога обычно свидетельствует о нарушении работоспособности узла.

Срок службы ДМРВ

Срок службы ДМРВ напрямую зависит от чистоты проходящего через него воздуха. Вероятную причину поломки расходомера в результате загрязненности нагревательных элементов расходомера можно выявить путем снятия датчика и визуального осмотра их состояния. Отложения на рабочих поверхностях будет показателем в необходимости замены узла либо попытки очистить налет.

Продлить срок службы датчика массового расхода воздуха можно, самостоятельно отслеживая состояние фильтрующего воздушного элемента двигателя и своевременно заменяя его на новый. Для очень пыльных российских дорог, что наблюдается в большинстве регионов, замена фильтра может потребоваться несколько раз за один год или каждые пять-шесть тысяч километров. При этом в официальных регламентах техобслуживания для большинства авто прописывается интервал замены не чаще, чем приезд на очередное ТО. В зависимости от производства, межсервисный интервал автомобиля может составлять 10000 км или 15000км.

Забитый пылью воздушный фильтр неизбежно ускорит образование губительного налета на чувствительных элементах ДМРВ и уменьшит срок его службы. Вследствие затрудненного прохождения воздуха и его нехватки для штатной работы двигателя, горючая смесь будет обогащенной, и побочным эффектом станет повышенный расход топлива.

Методы устранения неисправности ДМРВ

В ряде случаев допускается чистка ДМРВ, но это зависит от особенностей конструкции рабочих чувствительных элементов узла. Но даже при благоприятном исходе это временная мера и надолго восстановленного датчика не хватит. Узел при отказе работоспособности обычно заменяется целиком на новый.

При покупке ДМРВ необходимо учитывать, что новый датчик должен в точности соответствовать штатному. Это должна быть оригинальная деталь с таким же каталожным номером. В других случаях нормальная работа ДВС не гарантируется, даже если внешне датчики абсолютно идентичны. Оригинальный расходомер стоит недешево из-за сложности его производства и необходимости применения дорогостоящих компонентов.

Неполадки с силовым агрегатом могут быть вызваны нарушениями в работе целого ряда систем: зажигания, подачи топлива или воздуха, датчиков положения распредвалов, коленвала и еще ряда других. Однако одна из вероятных причин при появлении вышеперечисленных признаков неисправностей автомобиля – выход из строя MAF-сенсора. Расходов на комплексную диагностику двигателя в автосервисе можно попытаться избежать. Для этого достаточно знать, как проверить датчик массового расхода воздуха (дмрв) самостоятельно, путем применения предложенных выше несложных методов.

Датчик массового расхода воздуха ДМРВ (MAF) AUTLOG. Качественные запчасти могут иметь разумную цену

Немецкая компания Feddermann & Lankau GmbH, специализирующаяся на логистике запасных частей и усиливающая присутствие в Украине брендом AUTLOG , своими действиями подтверждает, что качественные запчасти могут иметь разумную цену. В этом материале специалисты компании на примере актуального для рынка и такого важного компонента автомобиля как датчик массового расхода воздуха расскажут, что собой представляют современные автозапчасти и как контролируется их качество при производстве. В этой категории товаров качественную альтернативу премиальным брендам могут предложить немногие производители.

Датчик массового расхода воздуха ДМРВ (англ. - Mass Airflow sensor - MAF) является важным компонентом эффективного процесса сгорания с низким уровнем выбросов. Расходомеры воздуха, как правило, встроены внутри впускного канала между воздушным фильтром и дроссельной заслонкой. Задача ДМРВ - точное определение массы, температуры и давления всасываемого воздуха. Он передает соответствующие характеристические значения в виде электрического сигнала на контроллер двигателя. На этой основе системы управления двигателем рассчитывают оптимальное количество подаваемого топлива.

Показания датчика массового расхода воздуха - основной параметр, по которому ЭБУ задает в том числе и угол опережения зажигания. Таким образом, работа расходомера воздуха влияет косвенным образом и на ресурс двигателя. В дизельных двигателях ДМРВ также осуществляет контроль рециркуляции отработавших газов.

Первое поколение ДМРВ
Датчик с нагреваемым проволочным чувствительным элементом. Датчик ДМРВ состоит из нагреваемого элемента - платиновой проволоки (поэтому и стоит недешево), и датчика температуры воздуха. В нем нет подвижных частей, создающих сопротивление потоку воздуха. В большинстве случаев ДМРВ устанавливается в перепускной канал во избежание влияния пульсаций во всасывающем патрубке.

Проволочный элемент нагревается электрически, а датчик температуры воздуха определяет требуемую степень нагрева. Ток нагрева управляется электроникой так, что разница температур между нагретой нитью элемента и воздушным потоком (100°C) остается постоянной. Следовательно, чем больше воздуха, проходящего через горячую проволоку, тем больше должен быть ток накала. Ток нагрева является мерой массы воздуха, проходящего через канал. Такой принцип температурной компенсации измерения учитывает колебания давления и температуры воздуха.

Этот тип измерения массы воздуха нарушается при увеличении загрязнения нагреваемой проволоки! Чистота нагреваемого элемента поддерживается путем кратковременного его нагревания (1000°C) после остановки двигателя.

Основная причина выхода из строя - загрязнение. Масло, попадая на чувствительные элементы сенсора, выводит его из строя. Продлить срок работы ДМРВ позволяет своевременная замена воздушного фильтра и контроль состояния поршневых колец и маслоотражателей. Их износ повышает процент паров масла в картерных газах.

Современное поколение ДМРВ
Чувствительный элемент термоанемометрических пленочных ДМРВ с электроподогревом также находится в воздушном потоке. Принцип работы - такой же, как и у датчика первого поколения. Разница лишь в том, что в этой конструкции сильный нагрев для очистки не требуется. Работу этих ДМРВ также ухудшают масло, влага и вибрации (дизельный двигатель). Эти датчики также подвержены износу, и, в зависимости от условий, или частично выходят из строя после 30000 км, или выдают неправильные результаты измерений.

AUTLOG - гарантия качества & разумная цена
Компания AUTLOG расположена в предместье Гамбурга. Название бренда расшифровывается как "автозапчасти и логистика" (AUToteile + LOGistik). Стратегия Feddermann & Lankau - продавать самые востребованные автозапчасти, изготовленные на лучших предприятиях по всему миру, по конкурентным ценам, при обязательном соответствии качеству премиальных марок. Линейка бренда покрывает порядка 80% наиболее востребованных позиций - в компании изначально решили не стремиться к полному покрытию, но обеспечить гарантированное качество и доступную цену.

Именно изъятие из ассортимента редко востребованных позиций обеспечивает высокую оборачиваемость товара, низкие затраты и хорошую прибыль. Продукция AUTLOG продается в первую очередь в Германии. А значит - соответствует всем местным стандартам, одним из самых строгих в мире. В Германии компания не только дает 2 года гарантии на свою продукцию, но и отвечает финансово за непредвиденный ремонт. Цена ошибки слишком велика, чтобы рисковать!

Эксперты компании регулярно посещают все заводы, которые производят продукцию для AUTLOG, а также их лаборатории.

Испытания датчиков MAF
Предприятие, производящее датчики массового расхода воздуха для бренда AUTLOG, оснащено современной лабораторией, позволяющей проводить все необходимые испытания.

Испытание ДМРВ при высокой температуре в 120°С (фото вверху) и при температурах -15°С и ниже (фото внизу).
Резкие перепады температур от - 40°С до +120°С: 10 минут при низких температурах, 2 минуты при изменяющихся, 10 минут при высоких температурах (25 повторений).

Испытание при температуре 35 +/-2 °C в 5% растворе соленой воды на восприимчивость к коррозии, длительность - 96 часов.

Процедуры тестирования и условия производства являются условием соответствия производителя условиям сертификации в соответствии со стандартом ISO/TS 16949. Согласно требованиям того же стандарта, датчики массового расхода воздуха AUTLOG производятся в атмосфере, очищенной от пыли.

Установка для калибровки ДМРВ. Абсолютно все датчики калибруются для обеспечения максимальной точности показаний.

Испытание на устойчивость к вибрациям. Это очень важные испытания, поскольку нередко слишком жесткие вибрации, особенно в дизельных двигателях, приводят к поломке микросхемы датчика.

Полезно знать для СТО

Дефект датчика массового расхода воздуха
проявляется следующим образом:
• загорается контрольная лампа проверки двигателя
• мотор переключается на шоссе в аварийный режим (максимальная скорость - 100 км/ч)
• диагностический прибор показывает неисправность ДМРВ или датчика кислорода (лямбда-зонда)
• неровный холостой ход
• при трогании слабая или с задержкой реакция на педаль газа
• пониженная скорость вращения двигателя
• ухудшение работы непрогретого двигателя
• потеря мощности
• неравномерная работа двигателя во всем диапазоне оборотов
• повышенный расход топлива


Причины возникновения дефектов ДМРВ:
• Слишком жесткие вибрации из-за ошибок проектирования или состояния двигателя, неправильная установка ДМРВ - повреждение микросхемы датчика.
• Грязная или поврежденная поверхность из-за плохой очистки всасываемого воздуха (при скорости потока около 50-200 м/с частицы действуют как наждак), слишком высокая влажность всасываемого воздуха, в зимний период с растворенной агрессивной дорожной солью или маслом от вентиляции картера.
• Естественный износ после 100 000 км - снижение выдаваемых датчиком значений и постепенная потеря мощности двигателя.
• Применение спортивного фильтра - увеличивает риск преждевременного износа ДМРВ.


Замена ДМРВ
Опыт показывает, что неисправный ДМРВ часто является единственной причиной неудовлетворительной работы двигателя.
• Обязательно перед заменой ДМРВ проверьте сопрягаемые элементы, как-то: не засорен ли всасывающий воздушный патрубок или воздушный фильтр, достаточно ли давление наддува (для турбодизеля), нет ли утечки из-за плохого уплотнения между ДМРВ и нагнетателем, заметно ли сильное загрязнение маслом и сажей клапана рециркуляции ОГ.
• Настоятельно рекомендуется корректировка блока управления двигателем!
• Рекомендуется: замена воздушного фильтра.


Опубликовано в журнале autoExpert №4 2017. Использование материалов возможно только со ссылкой на источник.

Информация о бренде AUTLOG и дистрибьюторах на сайте www.autoexpert-consulting.com - по ссылке...

датчик массового расхода воздуха (что это такое и как работает)

ДМРВ - датчик массового расхода воздуха автомобиля. Расскажем что это такое, основной принцип работы и обслуживание.

Что это такое

ДМРВ - это датчик массового расхода воздуха. Он служит для определения количество воздуха, идущего на заполнение цилиндров при работе двигателя авто. Датчик установлен во впускном тракте после воздушного фильтра и является одним из главных при работе системы впрыска.

Как работает

В двигатель приблизительно должно попадать за один такт 1 часть топлива и 14 частей воздуха, тогда мотор будет работать в оптимальном режиме. Если нарушить это взаимоотношение, будет или уменьшение мощности двигателя или перерасход топлива.

ДМРВ необходим, чтобы измерять идеальное количество поступившего в двигатель воздуха. Он рассчитывает количество воздуха и после этого отсылает информацию главному компьютеру, который на основании этих данных уже рассчитывает количество необходимого топлива.

Чем больше вы жмете на педаль газа, тем больше воздуха поступает в двигатель. ДМРВ это фиксирует и дает команду главному компьютеру увеличить количество топлива. Если вы едете равномерно, то расход воздуха не большой, а значит и расход топлива будет также небольшим. И за этим следит датчик массового расхода воздуха, который измеряет количество воздуха, поступившего в двигатель. Датчик устанавливается между воздушным фильтром и впуском двигателя.

Измерить количество воздуха, поступившего в двигатель, — значит, определить нагрузку двигателя. Когда водитель нажимает на педаль газа, дроссельная заслонка открывается и количество всасываемого воздуха увеличивается. Говорим: нагрузка увеличилась. И наоборот, педаль отпустили — нагрузка уменьшилась. Всё это задача для ДМРВ.

Обслуживание и ремонт

Датчик состоит из провода из платины диаметром 70 мкм, установленного в измерительной трубке, расположенной перед дроссельной заслонкой. Работа основана на принципе постоянства температуры. При эксплуатации платиновый провод ДМВР неизбежно загрязняется. Для предотвращения загрязнения после выключения двигателя провод в течение 1с накаляется до температуры 1000 С. При этом вся налипшая на него грязь сгорает. Этот процесс контролируется электронным блоком управления. Датчик расхода воздуха прост и надежен в эксплуатации, но это не означает, что его ремонт нужно производить самостоятельно. В случае поломки лучше обратиться к специалистам и если датчик расхода воздуха перестал работать - меняют на новый. Невозможность ремонта - минус ДМРВ, ведь стоимость нового велика.

Недостатком также является, что он измеряет объем поступающего воздуха. Поскольку для определения потребного количества топлива требуется определение массы воздуха, необходима корректировка показаний датчика в соответствии с плотностью воздуха. Для решения этой проблемы в воздухозаборник рядом с датчиком расхода ставят датчик температуры воздуха. Одним из направлений модернизации ДМРВ является - датчик измерения давления.

Датчик массового расхода воздуха очень требователен к состоянию воздушного фильтра. У него загрязняются платиновые спирали. Промыть их можно с помощью очистителя карбюратора, но если сделать это неправильно - придется покупать новый.

Замена датчика массового расхода воздуха

Нижний Новгород, ул. Деловая, 7 +7 (831) 422-14-24

Нижний Новгород, ул. Ванеева, 209А +7 (831) 422-14-22

г. Нижний Новгород, ул.Переходникова, д.28/1 +7 (831) 422-14-20

Нижний Новгород, ул. Коминтерна, 39, к.1 +7 (831) 422-14-16

Нижний Новгород, ул. Карла Маркса, 60в +7 (831) 422-14-15

Нижний Новгород, Комсомольское шоссе, 3б +7 (831) 422-14-23

Нижний Новгород, ул. Удмуртская, 10 +7 (831) 411-50-50, (831) 416-16-00, (831) 416-19-00

Нижний Новгород, пр. Гагарина, 37б +7 (831) 413-03-89

Нижний Новгород, ул. Дьяконова, 2г +7 (831) 414-65-76

г. Нижний Новгород, ул. Гаугеля 2А/2 +7 магазин: (831) 225-92-72, шиномонтаж: (831) 415-38-07

г. Нижний Новгород, ул. Юбилейная, 16а +7 (831) 413-38-16, (986) 763-34-03, (930) 66-86-777

Нижний Новгород, ул. Голубева, д. 7 +7 (831) 422-14-17

Нижний Новгород, ул. Фучика, д. 36 +7 (831) 422-14-18

Нижний Новгород, ул. Генерала Ивлиева, дом 24А +7 (831) 422-14-19

Дистальная миопатия - NORD (Национальная организация редких заболеваний)

УЧЕБНИКИ

Behrman RE, Kliegman RM, Jenson HB, eds. Учебник педиатрии Нельсона. 17-е изд. Elsevier Saunders. Филадельфия, Пенсильвания; 2005: 2060-9.

Аскади Г. Мышечная дистрофия конечностей и пояса. Руководство NORD по редким заболеваниям. Липпинкотт Уильямс и Уилкинс. Филадельфия, Пенсильвания. 2003: 625-6.

Rimoin D, Connor JM, Pyeritz RP, Korf BR, ред. Принципы и практика медицинской генетики Эмори и Римоан.4-е изд. Черчилль Ливингстон. Нью-Йорк, штат Нью-Йорк; 2002: 3285-302.

Bennett JC, Plum F, ред. Сесил Учебник медицины. 20-е изд. Филадельфия, Пенсильвания: W.B. Saunders Co; 1996: 2161-3.

СТАТЬИ ИЗ ЖУРНАЛА

Ламонт П.Дж., Удд Б., Масталья Ф. и др. Дистальная миопатия Laing с ранним началом: медленный дефект миозина с различными отклонениями при биопсии мышц. J Neurol Neurosurg Psychiatry. 2006; 77: 208-15.

Mastaglia F, Lamont PJ, Laing NG. Дистальные миопатии. Curr Opin Neurol. 2005; 18: 504-10.

Mahjneh I, Haravuori H, Paetau A, et al., Особый фенотип дистальной миопатии в большой финской семье. Неврология. 2003; 61: 87-92.

Ябе И., Хигаши Т., Кикучи С. и др. Мутации GNE, вызывающие дистальную миопатию с окаймленными вакуолями с воспалением. Неврология. 2003; 61: 384-6.

Томимицу Х., Исикава К., Симидзу Дж. И др., Дистальная миопатия с окаймленными вакуолями: новые мутации в гене GNE. Неврология. 2002; 59: 451-4.

Альберг Г., фон Телль Д., Борг К., Эдстрем Л., Анврет ​​М.Генетическая связь дистальной миопатии Веландера с хромосомой 2p13. Энн Неруол. 1999; 46: 399-404.

Feit H, Silbergleit A, Schneider LB и др., Слабость голосовых связок и глотки с аутосомно-доминантной дистальной миопатией: клиническое описание и локализация гена в 5q31. Am J Med Genet. 1998; 63: 1732-42.

Laing NG, Laing BA, Meredith C и др., Аутосомно-доминантная дистальная миопатия: сцепление с хромосомой 14. Am J Med Genet. 1995; 56: 422-7.

ИЗ ИНТЕРНЕТА

Sinnreich M, Karpati G.Обновлено: 24.05.2006. Миопатия с телом включения 2. В: Обзоры генов на тестах генов: информационный ресурс по медицинской генетике (онлайн-база данных). Авторские права, Вашингтонский университет, Сиэтл. 1997-2003 гг. Доступно на http://www.genetests.org.

Ламонт П., Лейнг Н.Г. Обновлено: 17.10.2006. Дистальная миопатия Лэйнга. В: GeneReviews at GeneTests: Medical Genetics Information Resource (онлайн-база данных). Авторские права, Вашингтонский университет, Сиэтл. 1997-2003 гг. Доступно на http://www.genetests.org.

Аоки М.Обновлено: 19.04.2006. Дисферлинопатия. В: GeneReviews at GeneTests: Medical Genetics Information Resource (онлайн-база данных). Авторские права, Вашингтонский университет, Сиэтл. 1997-2003 гг. Доступно на http://www.genetests.org.

Суоминен Т., Удд Б., Хакман П. Обновлено: 17.02.2005. Удд Дистальная миопатия. В: GeneReviews at GeneTests: Medical Genetics Information Resource (онлайн-база данных). Авторские права, Вашингтонский университет, Сиэтл. 1997-2003 гг. Доступно на http://www.genetests.org.

McKusick VA., изд. Интернет-Менделирующее наследование в человеке (OMIM). Балтимор. MD: Университет Джона Хопкинса; Запись №: 160500; Последнее обновление: 09.09.2004. Доступно по адресу: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/dispomim.cgi?id=160500 Дата доступа: 6 февраля 2006 г.

McKusick VA., Ed. Интернет-Менделирующее наследование в человеке (OMIM). Балтимор. MD: Университет Джона Хопкинса; Запись №: 604454; Последнее обновление: 10.12.2004. Доступно по адресу: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/dispomim.cgi?id=604454 Доступно: 6 февраля 2006 г.

МакКусик В.А., изд. Интернет-Менделирующее наследование в человеке (OMIM). Балтимор. MD: Университет Джона Хопкинса; Запись №: 605820; Последнее обновление: 06.04.2004. Доступно по адресу: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/dispomim.cgi?id=605820 Дата доступа: 6 февраля 2006 г.

McKusick VA., Ed. Интернет-Менделирующее наследование в человеке (OMIM). Балтимор. MD: Университет Джона Хопкинса; Запись №: 606070; Последнее обновление: 15.03.2005. Доступно по адресу: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/dispomim.cgi?id=606070 Доступно: 6 февраля 2006 г.

МакКусик В.А., изд. Интернет-Менделирующее наследование в человеке (OMIM). Балтимор. MD: Университет Джона Хопкинса; Запись №: 610099; Последнее обновление: 15.05.2006. Доступно по адресу: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/dispomim.cgi?id=610099 Дата доступа: 6 февраля 2006 г.

Жизнь с HIBM [Генетические болезни, Ближний Восток, HIBM, GNE Myopathy , Миопатия Нонака, DMRV, мышечные заболевания, дистрофия, инвалидность,]

Что такое HIBM?

HIBM (наследственные миопатии с включенными телами) - это группа генетических заболеваний, которые необычны для населения в целом.HIBM вызывает прогрессирующее мышечное истощение и слабость, что может привести к тяжелой инвалидности. Аутосомно-рецессивная форма миопатии GNE (IBM2 или DMRV Nonaka Myopathy) чаще встречается у людей ближневосточного, еврейского или японского происхождения, но пациентов можно найти в любой общине. HIBM был идентифицирован среди других меньшинств по всему миру. Выявлены пациенты азиатского (японского, корейского, китайского и др.), Европейского и южноамериканского происхождения, а также пациенты-мусульмане из стран Ближнего Востока, Палестины и Ирана.В Японии и многих странах Восточной Азии это заболевание известно как дистальная миопатия с окантованными вакуолями (DMRV).

Что делает HIBM?

HIBM вызывает прогрессирующую мышечную слабость и истощение. Мышечное истощение обычно начинается в возрасте 20–30 лет, хотя мы наблюдали начало в молодом возрасте в 17 лет и в старом в 52 года. Таким образом, оно влияет на наиболее продуктивные периоды жизни человека. Это может привести к тяжелой инвалидности в течение 10-15 лет, при этом многие пациенты прикованы к инвалидной коляске.Слабость и тяжесть могут варьироваться от человека к человеку. У некоторых в первую очередь замечается слабость в ногах. В некоторых других руки ослабляются быстрее, чем ноги. Слабость прогрессирует, что означает, что мышцы со временем становятся слабее. HIBM не влияет на мозг, внутренние органы или ощущения. Четырехглавая мышца относительно щадящая и остается сильной до поздних стадий заболевания, поэтому HIBM часто называют щадящей миопатией четырехглавой мышцы (QSM).

Некоторые ранние признаки HIBM включают:

  • Трудности при ходьбе на каблуках и беге;

  • Слабый указательный палец;

  • Частая потеря баланса.

Как это повлияет на меня?

Поскольку заболевание является рецессивным (повреждены оба аллеля гена), он может пострадать у любого, даже у здоровых родителей и родительских семей. HIBM чаще встречается у людей с ближневосточным, еврейским или японским происхождением, но пациентов можно найти в любой общине. Мы действительно предлагаем генетическое тестирование для тех, кто подозревает, что пострадал или имеет более высокий риск заражения.

Есть лечение?

В настоящее время не существует эффективных методов лечения HIBM.Исследователи из Hadassah, USC, UCLA, UCSD, Университета Джонса Хопкинса, Канады, NIH и Японии вносят свой вклад в поиск эффективного лечения. Вы также можете посмотреть статью «Развивающийся рекс», в которой описывается, как ученые разрабатывают лечение болезни. При надлежащей финансовой поддержке и осведомленности мы можем значительно ускорить исследования.

Есть ли надежда на лечение в ближайшее время?

Да. Основываясь на предварительных научных результатах, мы считаем, что разработать вмешательство для HIBM менее сложно, чем для многих распространенных миопатических состояний.Это связано с тем, что HIBM связан с мутациями фермента, который экспрессируется на низких уровнях в скелетных мышцах, но многие другие распространенные состояния мышечной атрофии вызваны мутациями в клеточных структурных белках, которые экспрессируются на очень высоких уровнях в мышцах.

Современные теории лечения основаны на следующих основных концепциях:

1. Терапия на основе субстрата / продукта: Эти теории предполагают введение небольших молекул, которые увеличивают внутримышечные запасы соединения, известного как сиаловая кислота.Это может включать введение соединений, богатых сиаловой кислотой (например, ВВИГ - внутривенные иммунные глобулины), предшественников сиаловой кислоты или других производных. В настоящее время этот метод, скорее всего, дойдет до клинических испытаний в кратчайшие сроки.

2. Генная или генная терапия: Эти теории предполагают введение нормальных или гиперактивных форм фермента GNE / MNK (фермента, мутировавшего в HIBM).

3. Клеточная терапия: Эти теории предполагают использование специализированных стволовых клеток, способных регенерировать мышцы и экспрессировать нормальную или гиперактивную форму GNE / MNK.

Не исключено, что лечение, основанное на вышеупомянутых концепциях, которое не оказалось полезным для других нарушений мышечной атрофии, может оказаться полезным для HIBM.

Для HIBM речь идет не о ПОИСКЕ лекарства, а о ФИНАНСИРОВАНИИ лекарства. Благодаря дополнительному финансированию и повышению осведомленности мы можем значительно ускорить исследования. ARM предлагает научные гранты исследовательским центрам, которые заинтересованы в разработке лечения HIBM.

Где я могу получить дополнительную информацию?

% PDF-1.4 % 1 0 объект > / ExtGState 268 0 R / Шрифт> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / B [158 0 R 157 0 R 156 0 R] / LastModified (D: 20080

4840 + 05'30 ') >> эндобдж 2 0 obj > эндобдж 3 0 obj > эндобдж 4 0 obj > эндобдж 5 0 obj > эндобдж 6 0 obj > эндобдж 7 0 объект > эндобдж 8 0 объект > эндобдж 9 0 объект > эндобдж 10 0 obj > эндобдж 11 0 объект > эндобдж 12 0 объект > эндобдж 13 0 объект > эндобдж 14 0 объект > эндобдж 15 0 объект > эндобдж 16 0 объект > эндобдж 19 0 объект > / ExtGState 292 0 R / Шрифт> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / B [155 0 R 154 0 R] / LastModified (D: 20080
4840 + 05'30 ') >> эндобдж 20 0 объект > эндобдж 21 0 объект > эндобдж 22 0 объект > эндобдж 23 0 объект > эндобдж 24 0 объект > эндобдж 25 0 объект > эндобдж 26 0 объект > эндобдж 27 0 объект > эндобдж 28 0 объект > эндобдж 29 0 объект > эндобдж 30 0 объект > эндобдж 33 0 объект > / ExtGState 316 0 R / Шрифт> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / B [153 0 R 152 0 R 151 0 R 150 0 R 149 0 R] / LastModified (D: 20080
4840 + 05'30 ') >> эндобдж 34 0 объект > эндобдж 35 0 объект > эндобдж 36 0 объект > эндобдж 37 0 объект > эндобдж 38 0 объект > эндобдж 39 0 объект > эндобдж 42 0 объект > / ExtGState 340 0 R / Шрифт> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / B [148 0 R 147 0 R 146 0 R] / LastModified (D: 20080
4840 + 05'30 ') >> эндобдж 45 0 объект > поток HLS [Pg & X-f.SтZHhh 1чҸ Гц / ہ jŪ3u> qKӹwwΑ iH $? _ 8? Ny, YPqLidS9Skx _ (4E9h

Фенотипическая изменчивость в китайской семье с окаймленной вакуолярной дистальной миопатией

Дистальная миопатия с окаймленными вакуолями (DMRV) характеризуется 1– 3 :

  • аутосомно-рецессивное наследование, но также может возникать спорадически

  • Появление симптомов в раннем взрослом возрасте, как правило, в возрасте от 20 до 30 лет

  • Слабость, начинающаяся в дистальных отделах мышц голени, обычно в передней большеберцовой мышце, при этом четырехглавая мышца остается относительно незатронутой

  • в основном миогенные изменения с определенными нейрогенными признаками на электромиографии (ЭМГ)

  • нормальная или слегка повышенная креатинкиназа сыворотки (СК)

  • биопсии мышц, показывающих окаймленные вакуоли без явных дистрофических признаков.

Другая наследственная миопатия с тельцами включения (HIBM) 4 имеет клинические и гистопатологические характеристики, аналогичные DMRV, и о ней сообщалось в основном с Ближнего Востока. Недавно мутации гена UDP- N -ацетилглюкозамин 2-эпимеразы / N -ацетилманнозамин-киназы ( GNE ) были идентифицированы у пациентов с аутосомно-рецессивным HIBM 5 и DMRV. 6 Следовательно, HIBM и DMRV могут быть одним и тем же заболеванием, а не двумя аллельными нарушениями. 6 Чтобы выяснить, вызвана ли DMRV у китайцев также мутациями гена GNE , мы исследовали клинические и генетические характеристики двух китайских пациентов с DMRV.

ПАЦИЕНТЫ И МЕТОДЫ

Мы обследовали двух пациентов с DMRV из китайской семьи, проживающей в Chung-Hwa, на юге Тайваня. Информированное согласие было получено от каждого члена семьи, и институциональный наблюдательный совет Мемориальной больницы Чанг Гун одобрил исследование.

Корпус II-2

У 50-летнего мужчины в 30 лет развилась коварная походка.В течение четырех лет он не мог стоять на каблуках и подниматься по лестнице. К 36 годам пациентка с трудом вставала из сидячего положения. За исключением его младшей сестры (случай II-3), ни у одного другого члена семьи не было подобного состояния.

Неврологическое обследование выявило истощение мышц как верхних, так и нижних конечностей, особенно дистальных отделов. Наблюдалась сильная слабость в мышцах передней большеберцовой мышцы, разгибателя пальцев и большого пальца, наряду с умеренной слабостью в малой ягодичной мышце и приводящих мышцах бедра, а также легкой слабостью в верхних конечностях и мышцах сгибателей шеи.Отсутствовали толчки в голеностопном и трехглавом суставах, но сохранялись коленные, двуглавые и плечевые толчки. В остальном неврологическое обследование без особенностей.

ЭМГ показала миопатические паттерны с некоторыми невропатическими изменениями; уровень CK в сыворотке был вдвое выше нормы. При световой микроскопии биопсия мышцы четырехглавой мышцы бедра показала различия в размере волокон с рассеянными, угловыми и гипертрофическими волокнами и умеренное усиление эндомизиального фиброза при окрашивании гематоксилином и эозином.Примечательно, что при окрашивании трихромом по Гомори наблюдались вакуоли с пурпурно-красной каймой. Электронная микроскопия выявила несколько аутофагических вакуолей, содержащих различные пластинчатые структуры и некоторые цитоплазматические нитевидные включения. Магнитно-резонансная томография (МРТ) показала фиброзные, жировые и атрофические изменения в мышцах переднего отдела голеней и, в меньшей степени, в мышцах заднего отдела. Подколенные сухожилия бедра, приводящие мышцы и тонкая мышца бедра были серьезно поражены, но четырехглавые мышцы бедра были сохранены (таблица 1 и рис. 1).

Стол 1

Клинические и лабораторные данные о дистальной миопатии Нонака у двух китайских пациентов

Рисунок 1

Tl-взвешенная магнитно-резонансная томография (МРТ) верхних конечностей показывает умеренную атрофию и повышенную интенсивность сигнала в длинных и больших приводящих мышцах (D), двуглавой мышце бедра (BF) и портняжной мышце (S). Четырехглавая мышца (Q) хорошо сохраняется в случае II-2 (A), но не в случае II-3 (B).

Корпус II-3

41-летняя женщина, младшая сестра в случае II-2, начала испытывать трудности при вставании в 26-летнем возрасте. Год спустя она не могла подниматься по лестнице и к 31 году была прикована к инвалидной коляске.

При обследовании у пациентки отмечена выраженная слабость и атрофия в дистальных отделах ног. Проксимальные мышцы также были атрофированы, особенно нижних конечностей. Шея, плечевой пояс, рука и мышцы кистей также демонстрировали слабость от легкой до умеренной.Сухожильные рефлексы отсутствовали. ЭМГ показала миопатические изменения во всех протестированных мышцах; уровень CK в сыворотке был несколько выше нормы. Биопсия мышцы выявила характерные признаки миопатии с многочисленными окаймленными вакуолями при световой микроскопии. МРТ показала значительную степень жировых, фиброзных и атрофических изменений в дистальном и проксимальном отделах нижних конечностей. Четырехглавая мышца была поражена средней степенью (см. Таблицу 1 и рис. 1).

Анализ ДНК

ДНК

экстрагировали из лейкоцитов периферической крови с использованием набора для экстракции ДНК (Stratagene; La Jolla, CA).Одиннадцать кодирующих экзонов (экзоны 2–12) и фланкирующие последовательности гена GNE амплифицировали с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) с использованием праймеров и условий, как описано ранее. 5 Продукты ПЦР подвергали секвенированию с использованием автоматического секвенатора ДНК (MegaBACE Analyzer; Molecular Dynamics, Division of Amersham Pharmacia Biotech, Buckingham, England).

РЕЗУЛЬТАТЫ

Анализ гаплотипов

Семейство было генотипировано с использованием полиморфных маркеров, связанных с геном GNE , выявляющих хромосому, расщепляющуюся с заболеванием (рис. 2).Анализ гаплотипов показал, что два пораженных брата и сестры (II-2 и II-3) унаследовали одни и те же хромосомы от своих родителей, что указывает на то, что фенотип заболевания был связан с маркерами, фланкирующими ген GNE (см. Рис. 2).

Рисунок 2

Гаплотипы для микросателлитных маркеров D9S1788, D9S1804 и D9S1791 (сверху вниз) отображаются для каждого члена китайской семьи. Нижняя панель: ДНК-полимеразная цепная реакция (ПЦР) и анализ ферментов рестрикции аллеля Ile241Ser.Дорожка M - это маркер размера.

Обнаружение мутации гена

GNE

Путем скрининга 11 экзонов гена GNE мы идентифицировали две новые мутации в этом семействе. Мутация Ile241Ser представляет собой трансверсию из T в G в экзоне 4, заменяющую изолейцин на серин в кодоне 241. Между тем мутация Trp513stop представляет собой переход G в A в экзоне 9, превращающий триптофан в терминацию в кодоне 513 (фиг. 3). Мутация Ile241Ser была подтверждена рестрикционным анализом Alu I.Амплифицированные фрагменты экзона 4 обрабатывали Alu I и фракционировали на 2,0% агарозном геле. Мутация создала новый сайт рестрикции Alu I в продукте ПЦР, так что при расщеплении фрагменты длиной 198 и 137 п.н. появлялись вместо фрагментов дикого типа в 335 п.н. (см. Фиг.2). Оба пациента, II-2 и II-3, унаследовали мутацию Ile241Ser от своей матери (I-2) и передали ее своим потомкам (III-1 и III-2). Мутация Trp513stop была унаследована от отца (I-1), и одно потомство (III-3) также несло мутацию.Мутация Trp513stop предсказывает нехватку 210 аминокислот на карбоксильном конце белка. Новая точечная мутация Ile241Ser не наблюдалась у 50 здоровых тайваньских субъектов.

Рисунок 3

Анализ последовательности продуктов полимеразной цепной реакции, амплифицированных из геномной ДНК пациента с дистальной миопатией с кольцевыми вакуолями (случай II-2). Трансверсия T-to-G по нуклеотиду 773 в экзоне 4 приводит к консервативной замене аминокислоты (Ile241Ser), а переход G-to-A в нуклеотиде 1590 в экзоне 9 приводит к бессмысленной мутации (Trp513stop).

ОБСУЖДЕНИЕ

У некоторых пациентов с DMRV болезнь может прогрессировать быстро, 1 , но у других она может прогрессировать медленно. 7 У двух пациентов, описанных здесь, наблюдались различия в клиническом течении болезни. Диффузное поражение мышц ног, наблюдаемое клинически в случае II-3, было связано с быстрым прогрессированием заболевания. Кроме того, МРТ показала серьезное поражение икроножных и четырехглавых мышц бедра у этого пациента.Напротив, в случае II-2 МРТ выявила специфическое распределение поражения мышц. Четырехглавая мышца бедра сохранилась хорошо, но передняя большеберцовая мышца, подколенные сухожилия и приводящие мышцы были сильно повреждены. Наши результаты согласуются с предыдущим исследованием, которое показало, что клиническое течение DMRV может отличаться у пациентов из одной семьи 8 ; однако молекулярный анализ в этом исследовании не проводился.

GNE , фермент, ограничивающий скорость, который катализирует первые две стадии биосинтеза сиаловой кислоты, имеет два функциональных домена, которые работают независимо: домен эпимеразы на амино (N) -конце и домен киназы в карбокси ( C) -конце. 9 Фермент катализирует превращение UDP- N -ацетилглюкозамина в N -ацетилманнозамин (ManNAc) и ManNAc в ManNAc 6-фосфат. Было показано, что сиалирование снижено, но не полностью отсутствует в мышцах и культивируемых клетках пациентов, поскольку все мутантные белки с миссенс-мутациями частично сохраняют обе ферментативные активности. 10 GNE в больших количествах экспрессируется в печени; следовательно, снижение ферментативной активности, вызванное миссенс-мутациями, может незначительно повлиять на синтез сиаловой кислоты в печени у пациентов с DMRV, а концентрации сиаловой кислоты сопоставимы с нормальными уровнями в крови. 10 Напротив, в скелетных мышцах DMRV снижено содержание сиаловой кислоты. 10 Пониженная ферментативная активность при слабой экспрессии белка GNE , вероятно, ответственна за более серьезное снижение синтеза сиаловой кислоты в мышцах по сравнению с таковым в плазме. Таким образом, избирательное участие может быть результатом поглощения мышцами сиаловой кислоты, которая может компенсировать дефектный синтез сиаловой кислоты в большинстве мышечных волокон.

V572L - самая частая мутация у японских пациентов с DMRV 6 , а M712T - самая частая мутация у еврейских пациентов с HIBM. 6 Хотя несколько других мутаций в гене GNE были идентифицированы недавно, о 11 Ile241Ser и Trp513stop ранее не сообщалось. Наше открытие двух новых мутантных аллелей в китайской семье с DMRV расширяет генетическую гетерогенность этого заболевания и позволяет провести более широкую фенотипико-генотипическую оценку. Tomimitsu et al 6 предположили, что типичные клинические признаки DMRV (V572L) и HIBM (M712T) являются результатом гомозиготных мутаций в киназном домене, тогда как вовлечение четырехглавой мышцы является результатом сложных гетерозиготных мутаций как в эпимеразном, так и в киназном доменах. .Однако у наших пациентов (из одной семьи) наблюдались одни и те же сложные гетерозиготные мутации в разных доменах белка, Ile241Ser в эпимеразном домене и Trp513stop в киназном домене, но демонстрировали разные фенотипы. Два каталитических домена молекулы GNE не всегда работают отдельно или независимо. 10 Например, хотя мутация A524V находится в пределах предсказанного киназного домена, она сильно ингибирует активность эпимеразы. Полученные данные свидетельствуют о том, что взаимодействие между эпимеразной и киназной активностями молекулы GNE не так просто, как мы думаем.Результаты также показывают, что ген (ы) модификатора или дополнительные факторы могут быть ответственными за фенотипические различия, хотя такие гены-модификаторы не были идентифицированы. Кроме того, недавно был идентифицирован фермент, отличный от GNE, N -ацетилглюкозаминкиназа с активностью N -ацетилманнозамин, которая может компенсировать киназную активность GNE. 12 Кроме того, сообщалось, что в одной семье с HIBM у некоторых пациентов не щадят четырехглавую мышцу. 13 Таким образом, эти результаты могут подтвердить нашу гипотезу. Для уточнения этой гипотезы необходимы дальнейшие клинические, биохимические и молекулярно-генетические анализы.

ССЫЛКИ

  1. Nonaka I , Sunohara N, Ishiura S, et al. Семейная дистальная миопатия с окаймленной вакуолью и пластинчатым (миелоидным) образованием тельца. J Neurol Sci 1981; 51: 141–55.

  2. Mizusawa H , Kurisaki H, Takatsu M, et al. Окантованная вакуолярная дистальная миопатия: клиническое, электрофизиологическое, гистопатологическое и компьютерно-томографическое исследование семи случаев. J. Neurol 1987; 234: 129–36.

  3. Nonaka I , Sunohara N, Satoyoshi E, et al. Аутосомно-рецессивная дистальная мышечная дистрофия: сравнительное исследование с дистальной миопатией с образованием окаймленных вакуолей. Энн Нейрол 1985; 17: 51–9.

  4. Mitrani-Rosenbaum S , Argov Z, Blumenfeld A, et al. Наследственная миопатия с тельцами включения отображается на хромосоме 9p1 – q1. Hum Mol Genet 1996; 5: 159–63.

  5. Eisenberg I , Avidan N, Potikha T, et al. Ген UDP-N-ацетилглускозамин-2-эпимеразы / N-ацетилманнозаминкиназы мутирован при рецессивной наследственной миопатии с тельцами включения. Нат Генет 2001; 29: 83–7.

  6. Tomimitsu H , Ishikawa K, Shimizu J, et al. Дистальная миопатия с окаймленными вакуолями: новые мутации в гене GNE. Неврология 2002; 59: 451–4.

  7. Mizusawa H , Kurisaki H, Takatsu M, et al. Окрашенная вакуолярная дистальная миопатия: ультраструктурное исследование. J. Neurol 1987; 234: 137–45.

  8. Markesbery WR , Griggs RC, Herr B. Дистальная миопатия: электронно-микроскопические и гистохимические исследования.Неврология, 1977; 27: 727–35.

  9. Stäche R , Hinderlich S, Weise C, et al. Бифункциональный фермент катализирует первые две стадии биосинтеза N-ацетилнейраминовой кислоты в печени крысы. J Biol Chem 1997; 272: 24319–24.

  10. Noguchi S , Keira Y, Murayama K, et al. Снижение активности UDP-GlcNAc 2-эпимеразы / ManNAc-киназы и сиалирования при дистальной миопатии с окаймленными вакуолями.J Biol Chem 2004; 279: 11402–7.

  11. Eisenberg I , Grabov-Nardini G, Hochner H, et al. Спектр мутаций GNE при наследственной миопатии с тельцами включения с сохранением четырехглавой мышцы. Хум Мутат 2003; 21: 99.

  12. Hinderlich S , Berger M, Keppler OT, et al. Биосинтез N-ацетилнейраминовой кислоты в клетках, лишенных UDP-N-ацетилглюкозамин 2-эпимеразы / N-ацетилманнозаминовой киназы.Biol Chem 2001; 382: 291–7.

  13. Neufeld MY , Sadeh M, Assa B, et al. Фенотипическая неоднородность в семейной миопатии с тельцами включения. Мышечный нерв 1995; 18: 546–8.

Влияние обработки N-гликозидазой F на окрашивание PNA, MAA и ...

Контекст 1

... при 4 ° C, а затем солюбилизация в буфере для образцов SDS. Белки разделяли и промотировали, как описано выше, а затем детектировали с помощью антитела IIH6 против -DG.Данные в этом исследовании были представлены как среднее значение ± стандартное отклонение. Статистические сравнения проводились с помощью t-критерия Стьюдента в условиях двустороннего распределения и двухвыборочной равной дисперсии. Чтобы идентифицировать углеводные части в мышечных гликопротеинах как пациентов DMRV, так и контрольных субъектов, окрашивание лектином замороженных срезов из нормального контроля (N1 и N2), патологического контроля (OPMD, EDMD и MD) и пациентов DMRV (DMRV-1). к ДМРВ-5С-2). В этом исследовании мы использовали пять лектинов, то есть PNA (специфичен для Gal ␤ 1-3GalNAc), SBA (специфичен для GalNAc 1-3Gal), RCA 120 (специфичен для Gal), WGA (специфичен для GlcNAc и Neu5Ac) и MAA (специфично для Neu5Ac 2-3Gal).Лектин PNA сильно реагировал с сарколеммой и соединительными тканями в срезах скелетных мышц у всех семи пациентов с DMRV (рис. 1), тогда как он почти не окрашивал пациентов в нормальном контроле и пациента OPMD в описанных условиях (рис. 1A). Кроме того, мы дважды окрашивали срезы скелетных мышц лектином PNA и антителом против дистрофина, классического маркера сарколеммы, чтобы определить локализацию реактивности PNA в мышцах DMRV. Объединенные изображения ясно показывают, что существует совместная локализация PNA-реактивных материалов и дистрофина в мышце DMRV, хотя слабая реактивность PNA также присутствует в соединительных тканях (рис. 1B).Напротив, PNA окрашивала соединительные ткани MD, EDMD и нормальных контрольных мышц (рис. 1B). Эти результаты указывают на увеличение дисахаридной единицы Gal 1-3GalNAc в плазматических мембранах скелетных мышц DMRV. Лектин SBA окрашивал соединительные ткани в мышцах DMRV сильнее, чем в контроле (рис. 2А). Окрашенные вакуоли, которые были подтверждены с помощью фазово-контрастной микроскопии, показали повышенную реактивность с SBA (рис. 2А). Саркоплазма нескольких атрофических волокон в срезах DMRV также показала повышенную реактивность с SBA (рис. 2A).Реактивность SBA была сильнее в окаймленных вакуолях и саркоплазме атрофических волокон в DMRV, чем в соединительных тканях. Затем мы дважды окрашивали мышцы DMRV лектином SBA и антителом против дистрофина. Локализация SBA-реактивных материалов явно отличалась от локализации дистрофина (рис. 2В). Это говорит о том, что материалы, реагирующие с SBA, не локализуются в сарколемме. Лектин RCA 120 реагировал с сарколеммой, соединительными тканями и кровеносными сосудами в скелетных мышцах DMRV, хотя он также реагировал с таковыми в контроле.Окантованные вакуоли и саркоплазма атрофических волокон в DMRV были сильно окрашены (рис. 2А). Эти результаты показывают, что концевые углеводные фрагменты Gal и GalNAc 1-3Gal увеличиваются в окаймленных вакуолях и саркоплазме атрофических волокон в DMRV. Напротив, MAA и WGA окрашивали сарколемму, соединительные ткани и кровеносные сосуды как в контрольной группе, так и в мышцах пациента с DMRV (рис. 2). Эти результаты указывают на присутствие углеводных фрагментов Neu5Ac 2-3Gal и (GlcNAc) n как в DMRV, так и в контрольных скелетных мышцах.Чтобы подтвердить результаты окрашивания лектина, мы выполнили лектиновый блоттинг-анализ с помощью высокоспецифичной системы ECL лектин-CDP-звезда, меченной DIG. MAA сильно реагировала с основной полосой при 250 кДа и несколькими второстепенными полосами как для контрольных, так и для экстрактов мышечных клеток DMRV (рис. 3A). Напротив, ПНК реагировала с сильно гликозилированными широкими полосами при 200 кД для клеточных экстрактов образцов скелетных мышц DMRV, но не в контрольных образцах (рис. 3В). Повышение реактивности PNA по отношению к гликопротеинам скелетных мышц DMRV может быть связано с увеличением остатков Gal ␤ 1-3GalNAc.Альтернативно, можно предотвратить взаимодействие субтерминальных остатков Gal ␤ 1-3GalNAc на гликопротеинах скелетных мышц с PNA путем дальнейшей модификации концевыми сиаловыми кислотами в нормальном контроле. Чтобы решить эту возможность, мы исследовали способность сиалидазы открывать скрытые сайты связывания ПНК на нормальных гликопротеинах скелетных мышц. Переваривание замороженных срезов из нормальных контролей сиалидазой C. perfringens привело к сильной реактивности с ПНК как при окрашивании лектина (рис. 4A), так и при анализе блоттинга лектина (рис. 4B).Это указывает на экспонирование латентных участков связывания для PNA в обработанных сиалидазой нормальных мышечных срезах, а также в необработанных DMRV срезах скелетных мышц. Чтобы охарактеризовать гликоформы, которые взаимодействовали с PNA, MAA и WGA в образцах скелетных мышц DMRV, срезы скелетных мышц DMRV обрабатывали N-гликозидазой F. Известно, что N-гликозидаза F расщепляет N-связанные высокоманнозные и гибридные и сложные олигосахариды. . Переваривание замороженных срезов скелетных мышц от пациентов с DMRV с помощью N-гликозидазы F не изменяло реактивность с PNA (Рисунок 5), тогда как оно снижало реактивность с MAA и WGA (Рисунок 5).Эти результаты показывают, что олигосахариды, которые реагировали с PNA в образцах скелетных мышц DMRV, были в основном O-связанными гликанами, тогда как те, которые реагировали с MAA и WGA, были в основном N-связанными гликанами. Согласно отчету Ногучи и его коллег, у пациентов с DMRV мутация гена GNE снижает ферментативную активность UDP-GlcNAc 2-эпимеразы. 16 Поэтому мы измерили содержание сиаловой кислоты в образцах скелетных мышц пациентов с DMRV. Гомогенаты, полученные из образцов скелетных мышц, были подвергнуты SDS-PAGE перед переносом на PVDF-мембраны.Мембраны были разрезаны на восемь равных частей в соответствии с уменьшением M r, а затем проанализированы на содержание сиаловой кислоты методом мягкого гидролиза-флюорометрической ВЭЖХ. Не было обнаружено различий в каждом срезе мембраны (M r от 20 000 до 250 000) между пациентами и нормальным контролем без лечения гликозидазой (данные не показаны). Затем экстракты скелетных мышц обрабатывали N-гликозидазой F для обнаружения компонентов сиаловой кислоты, связанных с О-связью. Снижение общего содержания сиаловой кислоты на 20% (рассчитанное как сумма содержания сиаловой кислоты в мембранных срезах 1-8) наблюдалось в мышцах DMRV при обработке N-гликозидазой F (контроль, 4.27 0,46 пмоль / мкг по сравнению с пациентами с DMRV, 3,51 Ϯ 0,26 пмоль / мкг). Кроме того, снижение на 20-40% наблюдалось для каждого из срезов мембраны 2 (M r, от 120 000 до 200 000; P 0,13), среза 3 (M r, от 80 000 до 120 000; P Ͻ 0,05), среза 4 (M r, От 60 000 до 80 000; P 0,05) и срез 6 (M r от 30 000 до 40 000; P 0,05) (Рисунок 6). Поскольку реактивность PNA была значительно увеличена у пациентов с DMRV, мы попытались идентифицировать сарколеммальные гликопротеины, которые реагировали с PNA. Мы получили две фракции экстрактов скелетных мышц в соответствии с ПНК-связывающей активностью с помощью ПНК-агарозы; ПНК-связывающая и ПНК-несвязывающая фракции.Фракция PNA экстрактов мышц DMRV прореагировала с моноклональным антителом IIH6, которое распознает углеводный эпитоп D -DG, в отличие от нормального контрольного экстракта (фиг. 7). Напротив, несвязывающая фракция нормального контрольного экстракта реагировала с IIH6 (фигура 7). Эти данные предполагают, что ␣ -DG содержит PNA-реактивные сахарные цепи у пациентов с DMRV. Кроме того, мы исследовали экспрессию гликозилированного -DG в биоптатах мышц пациентов с DMRV с IIH6.Положительное окрашивание было продемонстрировано у всех пациентов с DMRV, а также у нормальных контролей. Это предполагает, что основная структура сахарной цепи ␣ -DG, распознаваемая антителом IIH6, не была изменена у пациентов с DMRV (данные не показаны). Иммуноокрашивание антителами к -DG и ламинину ␣ 2 выявило нормальную экспрессию этих веществ на сарколеммальной мембране у пациентов с DMRV (данные не представлены). В текущем исследовании мы получили доказательства того, что гипосиалилирование O-связанных гликопротеинов, включая ␣ -DG, происходит в скелетных мышцах DMRV.Усиленное окрашивание лектином PNA, который связывает олигосахариды ядра 1 (дисахарид Gal ␤ 1-3GalNAc), наблюдалось в сарколемме скелетных мышц DMRV, но не в нормальном контроле или патологическом контроле (рис. 1, A и B). Это указывает на то, что сиалированные олигосахариды ядра 1, имеющие структуру Sia 2-3Gal ␤ 1-3GalNAc, были уменьшены. Напротив, нормальная реактивность с MAA и WGA, которые в основном связывают N-связанные сиалированные гликаны, наблюдалась в мышцах DMRV (Фигуры 2A и 3).Это открытие предполагает, что, по крайней мере, сиалирование N-связанных гликанов не так сильно влияет на DMRV. Кроме того, мы показали, что переваривание скелетных мышц здоровых пациентов с сиалидазой обнажает латентные сайты связывания ПНК (рис. 4). Лектиновый блоттинг экстрактов скелетных мышц DMRV с помощью PNA показал, что основные PNA-реактивные полосы - это полосы сильно гликозилированных белков от 150 до 200 кДа (рис. 3), а исследования преципитации показали, что одной из основных полос является ␣ -DG ( Рисунок 7).Sta sche и соавт. 15 сообщили, что уровень активности UDP-GlcNAc 2-эпимеразы был очень низким во многих органах, включая скелетные мышцы крыс, хотя секретирующие органы (печень, слюнные железы и слизистая оболочка кишечника) проявляли высокую специфическую активность. Мы попытались напрямую определить активность ферментов в биопсированных скелетных мышцах пациентов с DMRV и контрольных субъектов. Но уровень активности фермента был очень низким, ниже уровня обнаружения, как в контроле, так и в мышцах DMRV, как и ожидалось.В настоящее время мы разрабатываем более чувствительный метод анализа для определения активности фермента. В недавней статье Ногучи и его коллеги 16 сообщили, что активность UDP-GlcNAc 2-эпимеразы у экспрессированных мутантов C13S, h232Q, D176V, D177C, V331A и D378Y снижена до менее чем 20% от контрольного уровня. Активность киназы ManNAc у экспрессированных мутантов I472T, V572L, A630T, A631V и G703S резко снизилась. 16 Хиндерлих и его коллеги 27 также ...

Контекст 2

... кислотой, с последующим центрифугированием при 10 000 ϫ g в течение 5 минут при 4 ° C, а затем солюбилизацией в буфере для образцов SDS. Белки разделяли и промотировали, как описано выше, а затем детектировали с помощью антитела IIH6 против -DG. Данные в этом исследовании были представлены как среднее значение ± стандартное отклонение. Статистические сравнения проводились с помощью t-критерия Стьюдента в условиях двустороннего распределения и двухвыборочной равной дисперсии. Чтобы идентифицировать углеводные части в мышечных гликопротеинах как пациентов DMRV, так и контрольных субъектов, окрашивание лектином замороженных срезов из нормального контроля (N1 и N2), патологического контроля (OPMD, EDMD и MD) и пациентов DMRV (DMRV-1). к ДМРВ-5С-2).В этом исследовании мы использовали пять лектинов, то есть PNA (специфичен для Gal ␤ 1-3GalNAc), SBA (специфичен для GalNAc 1-3Gal), RCA 120 (специфичен для Gal), WGA (специфичен для GlcNAc и Neu5Ac) и MAA (специфично для Neu5Ac 2-3Gal). Лектин PNA сильно реагировал с сарколеммой и соединительными тканями в срезах скелетных мышц у всех семи пациентов с DMRV (рис. 1), тогда как он почти не окрашивал пациентов в нормальном контроле и пациента OPMD в описанных условиях (рис. 1A). Кроме того, мы дважды окрашивали срезы скелетных мышц лектином PNA и антителом против дистрофина, классического маркера сарколеммы, чтобы определить локализацию реактивности PNA в мышцах DMRV.Объединенные изображения ясно показывают, что существует совместная локализация PNA-реактивных материалов и дистрофина в мышце DMRV, хотя слабая реактивность PNA также присутствует в соединительных тканях (рис. 1B). Напротив, PNA окрашивала соединительные ткани MD, EDMD и нормальных контрольных мышц (рис. 1B). Эти результаты указывают на увеличение дисахаридной единицы Gal 1-3GalNAc в плазматических мембранах скелетных мышц DMRV. Лектин SBA окрашивал соединительные ткани в мышцах DMRV сильнее, чем в контроле (рис. 2А).Окрашенные вакуоли, которые были подтверждены с помощью фазово-контрастной микроскопии, показали повышенную реактивность с SBA (рис. 2А). Саркоплазма нескольких атрофических волокон в срезах DMRV также показала повышенную реактивность с SBA (рис. 2A). Реактивность SBA была сильнее в окаймленных вакуолях и саркоплазме атрофических волокон в DMRV, чем в соединительных тканях. Затем мы дважды окрашивали мышцы DMRV лектином SBA и антителом против дистрофина. Локализация SBA-реактивных материалов явно отличалась от локализации дистрофина (рис. 2В).Это говорит о том, что материалы, реагирующие с SBA, не локализуются в сарколемме. Лектин RCA 120 реагировал с сарколеммой, соединительными тканями и кровеносными сосудами в скелетных мышцах DMRV, хотя он также реагировал с таковыми в контроле. Окантованные вакуоли и саркоплазма атрофических волокон в DMRV были сильно окрашены (рис. 2А). Эти результаты показывают, что концевые углеводные фрагменты Gal и GalNAc 1-3Gal увеличиваются в окаймленных вакуолях и саркоплазме атрофических волокон в DMRV.Напротив, MAA и WGA окрашивали сарколемму, соединительные ткани и кровеносные сосуды как в контрольной группе, так и в мышцах пациента с DMRV (рис. 2). Эти результаты указывают на присутствие углеводных фрагментов Neu5Ac 2-3Gal и (GlcNAc) n как в DMRV, так и в контрольных скелетных мышцах. Чтобы подтвердить результаты окрашивания лектина, мы выполнили лектиновый блоттинг-анализ с помощью высокоспецифичной системы ECL лектин-CDP-звезда, меченной DIG. MAA сильно реагировала с основной полосой при 250 кДа и несколькими второстепенными полосами как для контрольных, так и для экстрактов мышечных клеток DMRV (рис. 3A).Напротив, ПНК реагировала с сильно гликозилированными широкими полосами при 200 кД для клеточных экстрактов образцов скелетных мышц DMRV, но не в контрольных образцах (рис. 3В). Повышение реактивности PNA по отношению к гликопротеинам скелетных мышц DMRV может быть связано с увеличением остатков Gal ␤ 1-3GalNAc. Альтернативно, можно предотвратить взаимодействие субтерминальных остатков Gal ␤ 1-3GalNAc на гликопротеинах скелетных мышц с PNA путем дальнейшей модификации концевыми сиаловыми кислотами в нормальном контроле.Чтобы решить эту возможность, мы исследовали способность сиалидазы открывать скрытые сайты связывания ПНК на нормальных гликопротеинах скелетных мышц. Переваривание замороженных срезов из нормальных контролей сиалидазой C. perfringens привело к сильной реактивности с ПНК как при окрашивании лектина (рис. 4A), так и при анализе блоттинга лектина (рис. 4B). Это указывает на экспонирование латентных участков связывания для PNA в обработанных сиалидазой нормальных мышечных срезах, а также в необработанных DMRV срезах скелетных мышц.Чтобы охарактеризовать гликоформы, которые взаимодействовали с PNA, MAA и WGA в образцах скелетных мышц DMRV, срезы скелетных мышц DMRV обрабатывали N-гликозидазой F. Известно, что N-гликозидаза F расщепляет N-связанные высокоманнозные и гибридные и сложные олигосахариды. . Переваривание замороженных срезов скелетных мышц от пациентов с DMRV с помощью N-гликозидазы F не изменяло реактивность с PNA (Рисунок 5), тогда как оно снижало реактивность с MAA и WGA (Рисунок 5). Эти результаты показывают, что олигосахариды, которые реагировали с PNA в образцах скелетных мышц DMRV, были в основном O-связанными гликанами, тогда как те, которые реагировали с MAA и WGA, были в основном N-связанными гликанами.Согласно отчету Ногучи и его коллег, у пациентов с DMRV мутация гена GNE снижает ферментативную активность UDP-GlcNAc 2-эпимеразы. 16 Поэтому мы измерили содержание сиаловой кислоты в образцах скелетных мышц пациентов с DMRV. Гомогенаты, полученные из образцов скелетных мышц, были подвергнуты SDS-PAGE перед переносом на PVDF-мембраны. Мембраны были разрезаны на восемь равных частей в соответствии с уменьшением M r, а затем проанализированы на содержание сиаловой кислоты методом мягкого гидролиза-флюорометрической ВЭЖХ.Не было обнаружено различий в каждом срезе мембраны (M r от 20 000 до 250 000) между пациентами и нормальным контролем без лечения гликозидазой (данные не показаны). Затем экстракты скелетных мышц обрабатывали N-гликозидазой F для обнаружения компонентов сиаловой кислоты, связанных с О-связью. Снижение общего содержания сиаловой кислоты на 20% (рассчитанное как сумма содержания сиаловой кислоты в мембранных срезах 1-8) наблюдалось в мышцах DMRV при обработке N-гликозидазой F (контроль, 4,27 ± 0,46 пмоль / мкг по сравнению с Пациенты с DMRV, 3.51 Ϯ 0,26 пмоль / мкг). Кроме того, снижение на 20-40% наблюдалось для каждого из срезов мембраны 2 (M r, от 120 000 до 200 000; P 0,13), среза 3 (M r, от 80 000 до 120 000; P Ͻ 0,05), среза 4 (M r, От 60 000 до 80 000; P 0,05) и срез 6 (M r от 30 000 до 40 000; P 0,05) (Рисунок 6). Поскольку реактивность PNA была значительно увеличена у пациентов с DMRV, мы попытались идентифицировать сарколеммальные гликопротеины, которые реагировали с PNA. Мы получили две фракции экстрактов скелетных мышц в соответствии с ПНК-связывающей активностью с помощью ПНК-агарозы; ПНК-связывающая и ПНК-несвязывающая фракции.Фракция PNA экстрактов мышц DMRV прореагировала с моноклональным антителом IIH6, которое распознает углеводный эпитоп D -DG, в отличие от нормального контрольного экстракта (фиг. 7). Напротив, несвязывающая фракция нормального контрольного экстракта реагировала с IIH6 (фигура 7). Эти данные предполагают, что ␣ -DG содержит PNA-реактивные сахарные цепи у пациентов с DMRV. Кроме того, мы исследовали экспрессию гликозилированного -DG в биоптатах мышц пациентов с DMRV с IIH6.Положительное окрашивание было продемонстрировано у всех пациентов с DMRV, а также у нормальных контролей. Это предполагает, что основная структура сахарной цепи ␣ -DG, распознаваемая антителом IIH6, не была изменена у пациентов с DMRV (данные не показаны). Иммуноокрашивание антителами к -DG и ламинину ␣ 2 выявило нормальную экспрессию этих веществ на сарколеммальной мембране у пациентов с DMRV (данные не представлены). В текущем исследовании мы получили доказательства того, что гипосиалилирование O-связанных гликопротеинов, включая ␣ -DG, происходит в скелетных мышцах DMRV.Усиленное окрашивание лектином PNA, который связывает олигосахариды ядра 1 (дисахарид Gal ␤ 1-3GalNAc), наблюдалось в сарколемме скелетных мышц DMRV, но не в нормальном контроле или патологическом контроле (рис. 1, A и B). Это указывает на то, что сиалированные олигосахариды ядра 1, имеющие структуру Sia 2-3Gal ␤ 1-3GalNAc, были уменьшены. Напротив, нормальная реактивность с MAA и WGA, которые в основном связывают N-связанные сиалированные гликаны, наблюдалась в мышцах DMRV (Фигуры 2A и 3).Это открытие предполагает, что, по крайней мере, сиалирование N-связанных гликанов не так сильно влияет на DMRV. Кроме того, мы показали, что переваривание скелетных мышц здоровых пациентов с сиалидазой обнажает латентные сайты связывания ПНК (рис. 4). Лектиновый блоттинг экстрактов скелетных мышц DMRV с помощью PNA показал, что основные PNA-реактивные полосы - это полосы сильно гликозилированных белков от 150 до 200 кДа (рис. 3), а исследования преципитации показали, что одной из основных полос является ␣ -DG ( Рисунок 7).Sta sche и соавт. 15 сообщили, что уровень активности UDP-GlcNAc 2-эпимеразы был очень низким во многих органах, включая скелетные мышцы крыс, хотя секретирующие органы (печень, слюнные железы и слизистая оболочка кишечника) проявляли высокую специфическую активность. Мы попытались напрямую определить активность ферментов в биопсированных скелетных мышцах пациентов с DMRV и контрольных субъектов. Но уровень активности фермента был очень низким, ниже уровня обнаружения, как в контроле, так и в мышцах DMRV, как и ожидалось.В настоящее время мы разрабатываем более чувствительный метод анализа для определения активности фермента. В недавней статье Ногучи и его коллеги 16 сообщили, что активность UDP-GlcNAc 2-эпимеразы у экспрессированных мутантов C13S, h232Q, D176V, D177C, V331A и D378Y снижена до менее чем 20% от контрольного уровня. Активность киназы ManNAc в экспрессированных мутантах I472T, V572L, A630T, A631V и G703S ...

Контекст 3

... увеличилась у пациентов с DMRV, мы попытались идентифицировать сарколеммальные гликопротеины, которые реагировали с PNA.Мы получили две фракции экстрактов скелетных мышц в соответствии с ПНК-связывающей активностью с помощью ПНК-агарозы; ПНК-связывающая и ПНК-несвязывающая фракции. Фракция PNA экстрактов мышц DMRV прореагировала с моноклональным антителом IIH6, которое распознает углеводный эпитоп D -DG, в отличие от нормального контрольного экстракта (фиг. 7). Напротив, несвязывающая фракция нормального контрольного экстракта реагировала с IIH6 (фигура 7). Эти данные предполагают, что ␣ -DG содержит PNA-реактивные сахарные цепи у пациентов с DMRV.Кроме того, мы исследовали экспрессию гликозилированного -DG в биоптатах мышц пациентов с DMRV с IIH6. Положительное окрашивание было продемонстрировано у всех пациентов с DMRV, а также у нормальных контролей. Это предполагает, что основная структура сахарной цепи ␣ -DG, распознаваемая антителом IIH6, не была изменена у пациентов с DMRV (данные не показаны). Иммуноокрашивание антителами к -DG и ламинину ␣ 2 выявило нормальную экспрессию этих веществ на сарколеммальной мембране у пациентов с DMRV (данные не представлены).В текущем исследовании мы получили доказательства того, что гипосиалилирование O-связанных гликопротеинов, включая ␣ -DG, происходит в скелетных мышцах DMRV. Усиленное окрашивание лектином PNA, который связывает олигосахариды ядра 1 (дисахарид Gal ␤ 1-3GalNAc), наблюдалось в сарколемме скелетных мышц DMRV, но не в нормальном контроле или патологическом контроле (рис. 1, A и B). Это указывает на то, что сиалированные олигосахариды ядра 1, имеющие структуру Sia 2-3Gal ␤ 1-3GalNAc, были уменьшены. Напротив, нормальная реактивность с MAA и WGA, которые в основном связывают N-связанные сиалированные гликаны, наблюдалась в мышцах DMRV (Фигуры 2A и 3).Это открытие предполагает, что, по крайней мере, сиалирование N-связанных гликанов не так сильно влияет на DMRV. Кроме того, мы показали, что переваривание скелетных мышц здоровых пациентов с сиалидазой обнажает латентные сайты связывания ПНК (рис. 4). Лектиновый блоттинг экстрактов скелетных мышц DMRV с помощью PNA показал, что основные PNA-реактивные полосы - это полосы сильно гликозилированных белков от 150 до 200 кДа (рис. 3), а исследования преципитации показали, что одной из основных полос является ␣ -DG ( Рисунок 7).Sta sche и соавт. 15 сообщили, что уровень активности UDP-GlcNAc 2-эпимеразы был очень низким во многих органах, включая скелетные мышцы крыс, хотя секретирующие органы (печень, слюнные железы и слизистая оболочка кишечника) проявляли высокую специфическую активность. Мы попытались напрямую определить активность ферментов в биопсированных скелетных мышцах пациентов с DMRV и контрольных субъектов. Но уровень активности фермента был очень низким, ниже уровня обнаружения, как в контроле, так и в мышцах DMRV, как и ожидалось.В настоящее время мы разрабатываем более чувствительный метод анализа для определения активности фермента. В недавней статье Ногучи и его коллеги 16 сообщили, что активность UDP-GlcNAc 2-эпимеразы у экспрессированных мутантов C13S, h232Q, D176V, D177C, V331A и D378Y снижена до менее чем 20% от контрольного уровня. Активность киназы ManNAc у экспрессированных мутантов I472T, V572L, A630T, A631V и G703S резко снизилась. 16 Hinderlich et al. 27 также показали, что активность киназы ManNAc мутанта M712T была снижена на 30% по сравнению с активностью фермента дикого типа.Все мутации, выявленные у пациентов с DMRV, вызывали частичное снижение ферментативной активности UDP-GlcNAc 2-эпимеразы или ManNAc-киназы. Schwarzkopf et al. 28 сообщили, что полная инактивация UDP-GlcNAc 2-epimerase посредством нацеливания на гены у мышей вызывает раннюю эмбриональную летальность, тем самым подчеркивая фундаментальные роли фермента и сиалирования во время развития. Эти сообщения убедительно свидетельствуют о том, что DMRV вызывается частичной потерей функции продукта гена. Было измерено общее содержание сиаловой кислоты в скелетных мышцах, культивируемых миобластах и ​​линиях лимфобластоидных клеток от пациентов с DMRV.Хиндерлих и его коллеги 27 не смогли обнаружить какое-либо влияние мутации M712T на экспрессию общих сиаловых кислот в лимфобластоидных клеточных линиях, тогда как Ногучи и коллеги 16 показали, что уровни сиаловой кислоты в фибробластах кожи и мышечных трубках пациентов с DMRV были значительно снижены от 60 до 74% от таковых в контрольных клетках, когда клетки культивировали в бессывороточной среде. Они показали, что в скелетных мышцах DMRV наблюдалось снижение содержания сиаловой кислоты на 25%.16 Однако мы не смогли найти никакой разницы между общим содержанием сиаловой кислоты в DMRV и контрольных мышцах (данные не показаны). В этом исследовании было проведено окрашивание лектина MAA и WGA на конкретные сиаловые кислоты, и результаты не показали значительных различий между DMRV и контрольными мышцами. Поскольку MAA и WGA в основном реагируют с N-связанной сиаловой кислотой (рис. 5), мы попытались определить содержание O-связанной сиаловой кислоты в скелетных мышцах пациентов с DMRV после лечения N-гликозидазой F.Результаты показали, что он снизился до 80% от контрольных мышц. В частности, снижение на 40% наблюдалось в срезе мембраны 4 (M r, от 60 000 до 80 000) и на 32% в срезе 6 (M r, от 30 000 до 40 000) (Рисунок 6). Наши данные свидетельствуют о том, что мутации V572L и G295D / A631V в основном влияют на экспрессию О-связанных сиаловых кислот в мышечных гликопротеинах. Несмотря на растущее число исследований генетики HIBM / DMRV, мало что известно о патофизиологии этих заболеваний.В частности, неясны структуры углеводных цепей гликопротеинов и их роль. Совершенно необходимо знать изменения в гликозилировании гликопротеинов сарколеммы, включая комплекс дистрофин-гликопротеин (DGC), который, как полагают, играет важную роль в качестве трансмембранного линкера между внутриклеточным цитоскелетом и внеклеточными компонентами. 29 Это приведет к лучшему пониманию роли углеводных структур в патофизиологических процессах.Кандидатным гликопротеином является ␣ -DG, который имеет преимущественно O-связанный гликан, включая Sia ␣ 2-3Gal ␤ 1-3GalNAc-Ser / The (гликан сиалильного ядра 1), 30 и редкие O-маннозилгликаны, состоящие из Sia ␣ 2-3Gal ␤ 1-4GlcNAc ␤ 1-2Man-Ser / Thr. 31 Врожденная мышечная дистрофия Фукуямы (FCMD) (OMIM 253800), заболевание мышцы-глаза-мозг (MEB) (OMIM 253280) и синдром Уокера-Варбурга (WWS) (OMIM 236670) - это врожденные мышечные дистрофии с аналогичными дефектами в мышцах и головном мозге разработка. Недавние исследования показали, что гипогликозилирование ␣ -DG, которое было обнаружено как отсутствие реактивности с моноклональными антителами VIA4 -1 и IIH6, распознающими углеводный эпитоп, является основным биохимическим дефектом этих врожденных мышечных дистрофий.32 Их назвали «␣ -дистрогликанопатиями». Недавно Huizing и его коллеги 33 сообщили, что HIBM-мышцы обнаруживают аберрантное гликозилирование -DG, подобное таковому при ␣ -дистрогликанопатиях, тогда как несколько других групп сообщили, что моноклональные антитела IIH6 показали нормальный паттерн экспрессии на сарколеммальной мембране у пациентов с DMRV. 16,34 Кроме того, мы не смогли обнаружить каких-либо значительных изменений в иммунореакции IIH6 с мышцами DMRV. Клинически DMRV обычно кажется умеренным по сравнению с -дистрогликанопатией, и у пациентов с этим заболеванием нет явных нарушений головного мозга.Это может быть связано с тем, что повреждение в DMRV расположено на концах сахарных цепей гликопротеинов, включая ␣ -DG, и, таким образом, основная структура будет сохраняться. Кроме того, остаточная активность продукта гена GNE будет определять клинические особенности. Хотя уникальные O-связанные олигосахариды на ␣ -DG, по-видимому, имеют решающее значение для взаимодействия с ламинином, агрином, перлеканом и нейрексином 32, обработка мышечного ␣ -DG сиалидазой не влияет на связывание ламинина или реактивность IIH6.35 Эти находки предполагают, что указанное связывание ламинина с мышечным ␣ -DG нечувствительно к изменениям в концевых остатках сиаловой кислоты. Вопросы о том, почему O-связанные гликопротеины сарколеммы преимущественно поражаются и как их гипосиалирование приводит к образованию окаймленных вакуолей и мышечной слабости, необходимо прояснить. В этом исследовании мы обнаружили, что SBA и RCA 120 сильно реагируют с окаймленными вакуолями и атрофическими волокнами, помимо сарколеммы и соединительной ткани в мышцах DMRV.Пораженные гликаны, демонстрируемые аномальным окрашиванием, могут быть связаны с развитием DMRV. Детальный анализ функций общих углеводных структур ␣ -DG может помочь. Мы пришли к выводу, что гликаны ядра 1, распознаваемые лектином PNA, увеличиваются в мышцах DMRV, вероятно, из-за нарушения образования сиалил O -гликана в гликопротеинах сарколеммы, включая ␣ -DG. Функциональные последствия этого открытия еще предстоит определить. В отличие от других β -дистрогликанопатий, DMRV / HIBM вовлекает внутриклеточные вакуоли, предполагая, что может быть задействован другой патофизиологический механизм.Дальнейшее понимание модификации гликопротеинов должно привести к развитию диагностики и лечения DMRV / HIBM. Мы благодарим докторов наук. Кевин Кэмпбелл (Медицинский институт Говарда Хьюза, Университет Айовы), Стефан Крёгер (Университет Майнца), Йошитака Танака (Университет Кюсю) и A.C.W. Заннеттино (Университет Аделаиды) за дар антител, использованных в этом исследовании; и доктора. Такахико Хара, Юки Накаяма, Кодзи Касахара, Икуо Вада и Тамао Эндо за ценные ...

Digimarc Corporation (DMRC) Stock Forum & Discussion

На бумаге этот магнат Louis Vuitton превзошел Джеффа Безоса как самого богатого человека в мире.Увидев его имя в новостях в эти выходные, я снова обратил внимание на гигантский ТАМ, существующий в вертикали защиты бренда.

В статье, написанной весной 2019 года, сообщалось, что, по словам двух человек, «LVMH привлекла постоянную команду разработчиков блокчейнов, которые работали в скрытом режиме более года, работая в тесном сотрудничестве со студией дизайна Ethereum ConsenSys и Microsoft Azure. знаком с проектом ». Их цель заключалась в том, чтобы иметь возможность отслеживать свои подлинные продукты по всему миру в процессе производства, первоначальной продажи, а затем любых последующих продаж.

Мы знаем, что DMRC лежит в основе Azure, и верим, что уже ведем бизнес с подобными LVMH, даже если только через MS. Вот вопрос: кто бы не хотел увидеть во время Суперкубка этого года рекламу, в которой подчеркивается защита потребителей, потому что все имеет сериализованную аутентификацию DMRC? Защищать такие бренды, как LV - это круто, но насколько важнее убедиться, что, покупая электронное оборудование, автомобильную запчасть или средство личной гигиены, вы получаете настоящего McCoy? Спросите человека, у которого была сильная сыпь и аллергическая реакция на поддельное средство для ухода за кожей, насколько он будет счастлив, если будет уверен в том, что он покупает и мажет себе на лицо или внутреннюю поверхность бедер!

Вот еще одна мысль.Иногда на этой доске идет громкий разговор, в ходе которого люди задаются вопросом, кто, черт возьми, захочет увидеть эту технологию раздавленной, прежде чем она взорвется. Когда я подумал о защите бренда сегодня, это заставило задуматься над этим вопросом на более общем уровне. Подумайте об этом ... очевидно, что Google не хочет успеха DMRC. То же самое и с более узнаваемыми прямыми конкурентами DMRC. То же самое и на фальшивомонетчиков, когда их способность продавать и продавать будет полностью нейтрализована технологией DMRC.Кажется вероятным, что большой дефицит по этому поводу также хочет, чтобы они потерпели неудачу по простым финансовым причинам. Но мы все еще касаемся только верхушки айсберга в отношении других отраслей, на которые сильно повлияют технологии DMRC. Сколько юристов выйдут из бизнеса из-за значительного сокращения числа судебных дел о контрафактной продукции? Подумайте о нынешних конечных пользователях переработанного пластика, которые не рады росту спроса на переработанный пластик. Подумайте о нынешних компаниях, которые печатают растительные колья для японских питомников (хорошо, шучу... не удержался) Список длинный, и разные стороны будут затронуты в большей и меньшей степени. Я только хочу отметить, что разрушительный характер технологий DMRC, возможно, гораздо более серьезен, чем многие из нас (включая меня) могут представить. Я не утверждаю, что со стороны таких партий существует какое-либо кооперативное сопротивление. Я говорю, однако, что не должно быть сюрпризом, когда встречный ветер постоянный. Я также говорю, что для меня стало гораздо более очевидным, что это действительно может быть возможность поколений, как говорит RM.

За то, чтобы мир узнал об этом быстро!

Официальный сайт Bioline International (сайт регулярно обновляется)



Неврология Индия
Публикации Medknow от имени Неврологического общества Индии
ISSN: 0028-3886 EISSN: 1998-4022
Vol. 58, Чис. 2, 2010, стр. 235-241

Неврология Индия, Vol. Март-апрель 2010 г., 58, № 2, с. 235-241

Оригинальный артикул

Дистальная миопатия с окаймленными вакуолями: отчет о клинических характеристиках в 23 случаях

А Налини 1 , Н. Гаятри 2 , Роза Рассвет 3

1 Отделение неврологии, Национальный институт психического здоровья и неврологии, Бангалор, Индия
2 Отделение невропатологии, Национальный институт психического здоровья и неврологии, Бангалор, Индия
3 Отделение нейровизуализации и интервенционной радиологии, Национальный Институт психического здоровья и неврологии, Бангалор, Индия

Адрес для корреспонденции : A Nalini, Отделение неврологии Национального института психического здоровья и неврологии, Хосур-роуд, Бангалор - 560 029, Индия, atchayaramnalini @ yahoo.co.in, [email protected]

Дата приема: 01 февраля 2010 г.

Номер кода: ni10062

PMID: 20508342

DOI: 10.4103 / 0028-3886.63804

Аннотация

Предпосылки: Дистальная миопатия с окаймленными вакуолями (DMRV) - аутосомно-рецессивная (AR) миопатия, клинически характеризующаяся преимущественным поражением передней большеберцовой мышцы, о которой сообщалось преимущественно в японской популяции.
Материалы и методы: Серия случаев пациентов с DMRV, наблюдаемых в течение 3 лет в национальном специализированном центре неврологических заболеваний на юге Индии.
Результат: Мы описываем клинические характеристики, результаты магнитно-резонансной томографии (МРТ) мышц и классические гистопатологические признаки у 23 пациентов. Было 12 мужчин и 11 женщин. Средний возраст дебюта составил 27,04 ± 6,35 года (10-39 лет). Начало было во втором или третьем десятилетии у большинства.Средний возраст на момент обращения составил 33,95 ± 6,35 года (25-48 лет). Средняя продолжительность заболевания составила 6,74 ± 4,8 года (1-18 лет). О кровном родстве сообщалось у восьми (34,8%) пациентов. Преобладающим и начальным проявлением у всех пациентов было двустороннее падение стопы. МРТ мышц показала классическое поражение мышц переднего отдела голени и мышц заднего отдела бедер, четырехглавая мышца была в норме. Гистопатология мышц показала многочисленные волокна, содержащие окаймленные вакуоли.Некротические волокна или фагоцитоз или регенерирующие волокна отмечались редко или отсутствовали.
Выводы: DMRV - редкая АР миопатия. Заболевание проявляется в виде прогрессирующего отвисания стопы и, следовательно, имеет множество дифференциальных диагнозов. Это легко ошибочно принять за нейропатию наследственного характера, и поэтому чрезвычайно важно распознать преимущественное поражение мышц и охарактеризовать фенотип. Это первый отчет из Индии с пациентами, имеющими характерный фенотип наследственной миопатии с тельцами включения Нонака / AR с сохранением четырехглавой мышцы, и все они были подтверждены гистопатологией.

Ключевые слова: Дистальная миопатия, ДМРВ, окаймленные вакуоли

Введение

Дистальная миопатия с окаймленными вакуолями (DMRV), первоначально описанная в 1981 году Nonaka et al. , является аутосомно-рецессивным (АР) заболеванием, клинически характеризующимся преимущественным поражением передней большеберцовой мышцы с сохранением четырехглавой мышцы. [1], [2], [3] DMRV был зарегистрирован преимущественно среди населения Японии, [3], [4], [5], [6], [7] с предполагаемой распространенностью 1 на миллион. [8] Это медленно прогрессирующая миопатия, приводящая к инвалидности, вызванная мутациями в гене, регулирующем синтез сиаловой кислоты. Заболевание начинается в раннем зрелом возрасте со слабости дистальных мышц нижних конечностей и проявляется провисанием стопы. [1], [3], [9] Уровни сывороточной креатинкиназы (КК) повышены лишь незначительно или в пределах нормы. [1], [10], [5], [6], [7], [9] Характерные гистологические особенности включают наличие многочисленных окаймленных вакуолей. [1], [10], [4], [5], [6], [7], [11] и эозинофильные включения в мышечных волокнах. [1], [10], [5], [12] Вакуолизированные волокна показывают аномальное накопление бета-амилоидного белка. [13] и гиперфосфорилированный тау-белок. [14] Отсутствие воспаления в атрофических мышечных волокнах - еще одна характерная особенность DMRV. [1], [10], [5], [6], [7] Первоначальным симптомом обычно является изменение походки, и пациенты достигают состояния, прикованного к инвалидной коляске, в возрасте от 26 до 57 лет, в среднем через 12 лет после Начало. [15] Наследственная миопатия с тельцами включения (HIBM), первоначально описанная в 1983 году как «окаймленная вакуолярная миопатия», не затрагивающая четырехглавую мышцу, представляет собой AR-заболевание, очень похожее на DMRV как клинически, так и патологически. [3], [16] Оба нарушения были картированы в одной и той же области на хромосоме 9 [17], [18] , и недавно было показано, что HIBM связан с мутациями в гене, кодирующем бифункциональный фермент UDP- N-ацетилглюкозамин 2-эпимераза / N-ацетилманозаминкиназа (GNE). [1] Кроме того, среди пациентов с DMRV были продемонстрированы гомозиготные или сложные гетерозиготные мутации в гене GNE. [15] Предполагается, что DMRV и HIBM являются аллельными нарушениями. [15] Дистальные миопатии, хотя, как сообщается, часто встречаются в скандинавских странах, в других частях мира они относительно редки.Спорадические и унаследованные AR дистальные миопатии чрезвычайно редки, и небольшие серии были зарегистрированы во многих частях мира. [19], [20], [21], [22], [23] В настоящем исследовании мы сообщаем о клинических характеристиках DMRV и результатах магнитно-резонансной томографии (МРТ) мышц из южной Индии.

Материалы и методы

Двадцать три взрослых пациента с клиническими признаками дистальной миопатии немиёси были включены в это исследование. Все пациенты были набраны из Клиники нервно-мышечных заболеваний Национального института психического здоровья и нейронаук, Бангалор, Индия.Все пациенты клиники проходят тщательное и тщательное обследование и фенотипическую характеристику. Заполняется исчерпывающая проформа для топографии поражения мышц. Все эти пациенты клинически имели классические черты дистальной миопатии Нонака / HIBM и патологически демонстрировали окаймленные вакуоли при биопсии мышц. Диагноз DMRV был поставлен на основании следующих предполагаемых результатов: (i) наследование AR и спорадические, (ii) появление симптомов в раннем взрослом возрасте, (iii) слабость, начинающаяся в дистальных мышцах ноги, обычно в передней большеберцовой мышце, с quadriceps мышца, остающаяся относительно незатронутой, (iv) в основном миогенные изменения, с определенными нейрогенными признаками на электромиографии (ЭМГ) , (v) нормальный или слегка повышенный КК в сыворотке, (vi) биопсия мышц , показывающая окаймленные вакуоли без очевидных дистрофические особенности. [1], [7], [10]

Биопсия мышц

Двадцать два из 23 пациентов прошли биопсию мышц после получения письменного информированного согласия. Другой пациент был сестрой одного из пациентов с типичными клиническими особенностями. Образцы мышц были взяты из следующих мышц: передняя большеберцовая мышца = 9; бицепс = 9; и квадрицепс = 4. Срезы окрашивали на ферментные и неферментные пятна (гематоксилин-эозин, модифицированный трихром Гомори, периодическая кислота Шиффа, NADH-TR, SDH, ATpase при pH 9.5 и 4.6). Иммуноокрашивание моноклональными антителами к дисферлину в качестве первичного и LSAB с меткой HRP в качестве вторичного антитела проводили во всех образцах.

Визуализация мышц

Семи пациентам были выполнены МРТ-исследования мышц ног и бедер. Трое из них получали изображения на аппарате 3T Philips Acheiva MR (Philips Medical Systems, DA Best, Нидерланды) производства Philips, Голландия, а оставшимся четырем - на 1.5T Seimens Magnetom Vision (Seimens, Эрлангер, Германия) производства Seimens, Германия.Катушка кузова использовалась в обеих машинах. Соответствующий протокол приведен в [Таблица - 1].

Статистика

Данные были проанализированы с использованием описательной статистики, такой как среднее стандартное отклонение для непрерывных переменных и процент частоты для категориальных переменных.

Результаты

Клинические

Среди 23 пациентов было 12 мужчин и 11 женщин. Средний возраст дебюта составил 27,04 ± 6,35 года (10-39 лет). Начало было у большинства во втором или третьем десятилетии.Средний возраст на момент обращения составил 33,95 ± 6,35 года (25-48 лет). Средняя продолжительность заболевания составила 6,74 ± 4,8 года (1-18 лет). О кровном родстве сообщалось у восьми (34,8%) пациентов. У пяти пациентов (43,5%) данные о родословной не были доступны. Подробности клинических проявлений представлены в [Таблица - 2] и [Таблица - 3]. Преобладающим проявлением у всех пациентов было двустороннее падение стопы. Наиболее заметными начальными симптомами в большинстве случаев были изменение походки (82,6%) и склонность к спотыканию. Четыре пациента сообщили о начале болезни в виде слабости захвата кисти, но по мере развития болезни свисание стопы было более выраженным, чем слабость кисти [[Рисунок - 1] a-c и [Рисунок - 2] a и b].Асимметричное начало слабости было отмечено у девяти (39,1%) пациентов, а временной интервал между поражением других конечностей составлял от 1 до 3 лет. В течение нескольких месяцев или нескольких лет у пациентов развилась слабость проксимальных отделов нижних конечностей и мышц верхних конечностей. На поздних стадиях были значительно поражены проксимальные и дистальные мышцы верхней конечности. Все пациенты были амбулаторными на момент оценки, за исключением четырех случаев, три из которых были прикованы к инвалидной коляске, а одному требовалась максимальная поддержка при передвижении.На момент обследования в общей сложности 14 пациентов (60,9%) были инвалидами и зависели от большинства видов повседневной деятельности, особенно тех, которые включали выполнение мелкой моторики руками. Длительность заболевания равная или более 10 лет на момент обращения была отмечена в пяти случаях. У трех пациентов, прикованных к инвалидной коляске, продолжительность болезни составляла 11, 10 и 3 года, и они достигли этого состояния после 8,5, 9 и 3 лет болезни соответственно. Инвалидность отдельного пациента представлена ​​в [Таблица - 4].

Слабость была особенно заметна в передней большеберцовой мышце, приводящих мышцах бедра и подколенных сухожилиях в нижних конечностях по сравнению с другими группами, которые были от легкой до умеренно слабой [Таблица - 5]. Сгибатели шеи у большинства были слабыми, а у некоторых были истощены передние мышцы шеи. В верхних конечностях дистальные мышцы и мышцы плечевого пояса были поражены сильнее, чем мышцы рук. Особенно слабыми были сгибатели длинных пальцев. Квадрицепс был минимально слабым или в большинстве случаев щадящим [Таблица - 6]. У всех 23 пациентов глубокие сухожильные рефлексы верхних конечностей были снижены или отсутствовали.В нижних конечностях коленный рефлекс уменьшился до отсутствия у 21 (91,3%) пациента и от нормального до быстрого у двух (8,6%) пациентов. Толчок в голеностопном суставе был вялым или отсутствовал у всех 23 пациентов. Все амбулаторные пациенты имели походку вразвалку, признак Гауэра и отвисшую ступню. Семь пациентов имели положительный семейный анамнез. В пяти семьях пострадал второй брат или сестра, в то время как родители были нормальными. В остальных двух пострадали матери. Среди пострадавших братьев и сестер только двое могли быть обследованы, а одна мать была обследована.

МРТ мышц

Классически поражались мышцы переднего отдела голени и мышцы заднего отдела бедер и, в меньшей степени, задние мышцы ног [Таблица - 5]. Четырехглавая мышца была в норме; аддукторы были затронуты только у двух пациентов, в отличие от тяжести клинического поражения. Подколенные сухожилия у большинства были серьезно поражены. Передняя большеберцовая мышца была наиболее сильно пораженной мышцей, в то время как длинная малоберцовая мышца была поражена серьезно у трех пациентов.У некоторых были поражены Gastrocnemius и Soleus от легкой до умеренной степени. Пораженные мышцы сильно поражены атрофией и замещением жировой ткани. Интересно, что фиброз пораженной мышцы не был заметной особенностью. Результаты классической МРТ показаны на [Рисунок - 3] A-F и [Рисунок - 4] A-D.

Результаты биопсии мышц

У 22 пациентов обнаружено наличие ряда волокон с окаймленными вакуолями без признаков миозита или обширных изменений дистрофии.Многочисленные волокна содержали окаймленные вакуоли [Рисунок - 5]. Были различия в размере волокон, с атрофическими волокнами и группировками. Некротические волокна или фагоцитоз или регенерирующие волокна редко отмечались или отсутствовали. Не было различий между семейными и спорадическими случаями в отношении клинических, лабораторных или патологических данных. Иммуногистохимия с антителом к ​​дисферлину была положительной во всех образцах.

Обсуждение

Дистальные миопатии, хотя, как сообщается, часто встречаются в скандинавских странах, в других частях мира они относительно редки.Спорадические и унаследованные AR дистальные миопатии также крайне редки, хотя о них сообщают из разных частей мира. [19], [20], [21], [22], [23] DMRV - это отдельная клиническая сущность, унаследованная через признак AR с преобладанием женщин. [1], [10], [9] У наших пациентов диагностировали ДМРВ на основании как клинических признаков, так и патологии мышц. В нашей серии женского перевеса не наблюдалось. Средний возраст начала заболевания в нашей группе составлял около 25 лет, и первые симптомы мышечной слабости ног проявились в большинстве случаев во втором или третьем десятилетии.На начальных этапах более выраженно поражались дистальные мышцы ног, а позже проксимальные мышцы, подвздошно-поясничная мышца и двуглавая мышца бедра были поражены рано и серьезно. Четырехглавая мышца была сохранена в большинстве случаев. Родство присутствовало у одной трети наших пациентов, и у семи был положительный семейный анамнез. В обзоре 37 случаев японского происхождения средний возраст начала заболевания составлял 26,1 года, а начало заболевания в третьем десятилетии было отмечено в 64% случаев. Родство родителей было зарегистрировано примерно в 40% их случаев, и 12 пациентов из семи родословных имели семейный анамнез.Первоначальным симптомом была мышечная слабость ног или нарушение походки у 33 (90%) пациентов. У всех была слабость, которая преимущественно проявлялась в дистальных отделах мышц ног или диффузно, но четырехглавая мышца была сохранена или была слабо поражена в нескольких случаях. [9] Два пациента, о которых сообщили Kira et al. У была высокая сводчатая стопа (возраст 21 и 27 лет). [24] Трое из наших пациентов с длительным периодом болезни имели высокие сводистые стопы с молотковыми пальцами. Клинически из семи из девяти пациентов, у которых продолжительность заболевания составляла более 10 лет, пять не лечились.В нашей серии исследований три пациента стали прикованными к инвалидной коляске к концу 3–9 лет болезни. Пациенты с DMRV могут прогрессировать быстро [1] или медленно. [7] Наша серия случаев также показала, что клиническое течение DMRV может отличаться у пациентов из одной семьи и между семьями. [19]

Уровень КК в сыворотке был слегка повышен или в пределах нормы у 37 японских пациентов. [9] В наших случаях сывороточный КК также был нормальным или минимально повышенным, за исключением трех случаев, когда он был в пять раз выше нормального уровня.Однако окрашивание дисферлином у этих пациентов было положительным. У пациентов с DMRV были описаны высокие уровни CK. В исследовании Nonaka et al. , ЭМГ показала миопатическую картину во всех и была связана с некоторыми спонтанными разрядами в виде положительных острых волн и потенциалов фибрилляции. [10] Электродиагностические исследования в нашем исследовании также показали миопатические особенности с нормальной нервной проводимостью.

Наследование и симптомы миопатии Миёси (ММ) напоминают симптомы DMRV.Преимущественное поражение икроножных, а не малоберцовых мышц и высокие уровни КК при ММ являются клиническими данными, имеющими решающее значение для дифференциальной диагностики. Наиболее выдающимися морфологическими особенностями DMRV являются миопатические изменения и образование окаймленных вакуолей. [10] Такие вакуоли наблюдаются при различных нейропатических и миопатических процессах, [11], [24], [25], , но клинические проявления важны для рассмотрения DMRV. Семейная вакуолярная миопатия с наследованием AR, клинически характеризующаяся прогрессирующей дистальной и проксимальной мышечной слабостью и истощением, начинающимся в раннем взрослом возрасте, но всегда сохраняющая четырехглавую мышцу бедра даже на поздних стадиях, как сообщалось, встречалась у евреев персидского происхождения. [16, [26] Асканас и Энгель ввели термин HIBM. [27], [28] Это включает несколько синдромов, которые могут быть унаследованы как AR или аутосомно-доминантный признак, а семейная миопатия у персидских евреев считается AR-формой HIBM. [27], [28], [29] Существует клиническое, патологическое и наследственное сходство между AR HIBM у персидских евреев и теми, которые наблюдаются в DMRV у японского населения, и являются аллельными заболеваниями. [28] Все наши пациенты имели признаки DMRV и, вероятно, имели дистальную миопатию Нонака или AR HIBM.У четверых из них, у которых возникла слабость длинных сгибателей в дистальных отделах мышц верхней конечности, вероятно, была HIBM. В двух семьях пострадали мать и ребенок. Все наши пациенты имели тип наследования АР. Сходство между зарегистрированными спорадическими и наследственными случаями делает вероятным, что спорадические случаи принадлежат к рецессивно наследуемой группе, в которой только один член родственного брата имеет наследственное заболевание. [30] Наши пациенты со спорадической и семейной формами имели сходные клинические проявления.МРТ мышц нижних конечностей классически показала поражение переднего отдела голени и подколенных сухожилий. Даже у пациентов с сильной слабостью квадрицепсы были сохранены. Аналогичные результаты были получены и другими исследователями. [31], [32], [33] МРТ мышц может быть ценным инструментом для диагностики наследственных нервно-мышечных расстройств. Каждое сканирование предоставляет несколько изображений для каждого сегмента, что позволяет точно оценить массу отдельных мышц и их вовлеченность. Характер поражения мышц более важен, чем тяжесть поражения отдельных мышц. [34] Недавно было высказано предположение, что миопатия возникает из-за мутаций в гене, регулирующем синтез сиаловой кислоты, и это может иметь терапевтическое значение.

Таким образом, это первый отчет по DMRV из Индии. Большинство пациентов приехали из южных штатов Индии. Нам не удалось провести генетические исследования наших пациентов.

Список литературы

1. Nonaka I, Sunohara N, Ishiura S, Satoyoshi E.Семейная дистальная миопатия с окаймленной вакуолью и пластинчатым (миелоидным) образованием тела. J. Neurol Sci 1981; 51: 141-55. Вернуться к цитированному тексту № 1
2. Нонака И., Мураками Н., Сузуки Ю., Каваи М. Дистальная миопатия с окаймленными вакуолями. Нейромышечные расстройства 1998; 8: 333-7. Вернуться к цитированному тексту № 2
3. Нонака И. Дистальные миопатии. Курр Опин Neurol 1999; 12: 493-9. Вернуться к цитированному тексту № 3
4. Ideta T, Shikai T, Uchino M, Okajima T.Дистальная миопатия: сообщение о четырех случаях в двух семьях. Clin Neurol (Токио) 1973; 13: 579-86. Вернуться к цитированному тексту № 4
5. Кумамото Т., Фукухара Н., Нагашима М., Канда Т., Вакабаяси М. Дистальная миопатия: гистохимическое и ультраструктурное исследование. Arch Neurol 1982; 39: 367-71. Вернуться к цитированному тексту № 5
6. Мацубара С., Танабе Х. Наследственная дистальная миопатия с нитчатыми включениями. Acta Neurol Scand 1982; 65: 363-8. Вернуться к цитированному тексту №6
7. Mizusawa H, Kurisaki H, Takatsu M, Inoue K, Mannen T., Toyokura Y, et al. . Окрашенная вакуолярная дистальная миопатия: клиническое, электрофизиологическое, гистопатологическое и компьютерно-томографическое исследование семи случаев. J. Neurol 1987; 234: 129-36. Вернуться к цитированному тексту № 7
8. Асканас В., Энгель В.К., Альварес РБ. Иммунореактивный белок-предшественник -β-амилоида, β-амилоидный белок и убиквитин в вакуолизированных мышечных волокнах спорадического и наследственного миозита с тельцами включения.Энн Нейрол 1992; 32: 278. Вернуться к цитированному тексту № 8
9. Sunohara N, Nonaka I, Kamei N, Satayoshi E. Дистальная миопатия с образованием окаймленной вакуоли: последующее исследование. Мозг 1989; 112: 65-83. Вернуться к цитированному тексту № 9
10. Нонака И., Сунохара Н., Сатойоши Э., Терасава К., Йонемото К. Аутосомно-рецессивная дистальная мышечная дистрофия: сравнительное исследование с дистальной миопатией с образованием окаймленных вакуолей. Энн Нейрол 1985; 17: 51-9.Вернуться к цитированному тексту № 10
11. Фукухара Н., Кумамото Т., Тубаки Т. Вакуоли с краями. Acta Neuropathol (Berl) 1980; 51: 229-35. Вернуться к цитированному тексту № 11
12. Кузухара С., Наканиши Т. Тубуломембранозные и похожие на отпечатки пальцев включения в биопсированной мышце дистальной миопатии с окаймленными вакуолями. Acta Neuropathol (Berl) 1984; 62: 194-200. Вернуться к цитированному тексту № 12
13. Мураками Н., Ихара Ю., Нонака И.Дегенерация мышечных волокон при дистальной миопатии с образованием окаймленных вакуолей. Acta Neuropathol 1995; 89: 29-34. Вернуться к цитированному тексту № 13
14. Murakami N, Ishiguro K, Ihara Y, Nonaka I, Sugita H, Imahori K. Иммунореактивность белка тау в мышечных волокнах с окаймленными вакуолями отличается от таковой в регенерирующих мышечных волокнах. Acta Neuropathol 1995; 90: 467-71. Вернуться к цитированному тексту № 14
15. Нишино И., Ногучи С., Мураяма К., Дрисс А., Суги К., Оя Ю., и др. .Дистальная миопатия с окаймленными вакуолями аллельна наследственной миопатии с тельцами включения. Неврология 2002; 59: 1689-93. Вернуться к цитированному тексту № 15
16. Аргов З., Яром Р. «Миопатия с окантованной вакуолью» с сохранением квадрицепса: уникальное заболевание у иранских евреев. J. Neurol Sci 1984; 64: 33-43. Вернуться к цитированному тексту № 16
17. Mitrani-Rosenbaum S, Argov Z, Blumenfeld A, Seidman CE, Seidman JG. Наследственная миопатия с тельцами включения отображается на хромосоме 9p1-q1.Hum Mol Genet 1996; 5: 159-63. Вернуться к цитированному тексту № 17
18. Икеучи Т., Асака Т., Сайто М., Танака Х., Хигучи С., Танака К., и др. . Генный локус аутосомно-рецессивной дистальной миопатии с окаймленными вакуолями отображается на хромосоме 9. Ann Neurol 1997; 41: 432-7. Вернуться к цитированному тексту № 18
19. Markesbery WR, Griggs RC, Herr B. Дистальная миопатия: электронно-микроскопические и гистохимические исследования. Неврология 1977; 27: 727-35.Вернуться к цитированному тексту № 19
20. Kuhn E, Schroder JM. Новый тип дистальной миопатии у двух братьев. J. Neurol 1981; 226: 181-5. Вернуться к цитированному тексту № 20
21. Кратц Р., Брук М.Х. Дистальная миопатия. В Винкен П.Дж., Брюн Г.В., редакторы. Справочник по клинической неврологии. Vol. 40. Амстердам: Эльзевир / биомедицина Северной Голландии; 1980. с. 471-83. Вернуться к цитированному тексту № 21
22. Миллер Р.Г., Бланк Н.К., Лайзер РБ.Спорадическая дистальная миопатия с началом в раннем взрослом возрасте. Энн Нейрол 1979; 5: 220-7. Вернуться к цитированному тексту № 22
23. Miyoshi K, Tada Y, Iwamasa M. Аутосомно-рецессивная дистальная миопатия с окантованной вакуолью, характерная для Японии. Jpn J Hum Genet 1975; 52: 62-3. Вернуться к цитированному тексту № 23
24. Кира Дж., Фуджи Н., Ишимото С., Гото И., Куроива Ю. Дистальная миопатия с выраженными вакуолярными изменениями в мышцах: клинико-патологическое исследование 6 случаев.Риншо Синкэйгаку 1982; 22: 594-601. Вернуться к цитированному тексту № 24
25. Dubowitz V, Brooke MH. Биопсия мышц: современный подход. Лондон, Филадельфия, Торонто: Сондерс; 1973. Вернуться к цитированному тексту No. 25
26. Садех М., Гадот Н., Хадар Х., Бен-Дэвид Э. Вакуолярная миопатия с сохранением четырехглавой мышцы. Мозг 1993; 116: 217-32. Вернуться к цитированному тексту № 26
27. Асканас В., Энгель В.К., Альварес РБ.β - эпитопы предшественников амилоида в мышечных волокнах миозита с тельцами включения. Энн Нейрол 1993; 34: 551-60. Вернуться к цитированному тексту № 27
28. Асканас В., Энгель В.К. Новые достижения в понимании спорадического миозита с тельцами включения и наследственных миопатий с тельцами включения. Курр Опин Рематол 1995; 7: 486-96. Вернуться к цитированному тексту № 28
29. Григгс Р.С., Асканас В., ДиМауро С., Энгель А., Карпати Дж., Менделл Дж. Р., и др. .Миозит с тельцами включения и миопатии. Энн Нейрол 1995; 38: 705-13. Вернуться к цитированному тексту № 29
30. Айзекс Х., Баденхорст М., Уистлер Т. Аутосомно-рецессивная дистальная миопатия. Дж. Клин Патол 1988; 41: 188-94. Вернуться к цитированному тексту № 30
31. Mizuno T, Motonaga T, Yanagida K, Takanashi Y, Yamaguchi K. Результаты МРТ в исследованиях дистальной миопатии с окаймленными вакуолями. Ринсё Синкэйгаку 1989; 29: 1290-3. Вернуться к цитированному тексту №31
32. Ro LS, Lee Chen YR, Wu YR, Lee M, Hsu PY, Chen CM. Фенотипическая изменчивость в китайской семье с окаймленной вакуолярной дистальной миопатией. Журнал Neurol Neurosurg 2005; 76: 752-5. Вернуться к цитированному тексту № 32
33. Кристин М., Маликдан В., Нонака И. Обзор дистальных миопатий: основные сведения о дистальных миопатиях с окаймленными вакуолями. Неврология Индия 2008; 56: 314-24. Вернуться к цитированному тексту № 33
34. Mercuri E, Pichiecchio A, Allsop J, Messina S, Pane M, Muntoni F. МРТ мышц при наследственных нервно-мышечных расстройствах: прошлое, настоящее и будущее. J Mag Res imaging 2007; 25: 433-35. Маликдан М.К., Ногучи С., Нишино И. Последние достижения в области дистальной миопатии с окаймленными вакуолями (DMRV) или HIBM: перспективы лечения.

Comments |0|

Legend *) Required fields are marked
**) You may use these HTML tags and attributes: <a href="" title=""> <abbr title=""> <acronym title=""> <b> <blockquote cite=""> <cite> <code> <del datetime=""> <em> <i> <q cite=""> <s> <strike> <strong>
Category: Разное